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尿胆原定性测定(干法学法)

2019.5.07

1. 实验原理

试带有两种,一种是以Ehrlich醛反应为基础的快速检验试带,另一种是利用尿胆原与重氮化合物的耦联反应,根据产生红色的深浅判断尿胆原含量。既可以定性,也可以定量。

2. 标本采集

2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。

2.2 标本种类:新鲜尿液

2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。

3. 标本储存:排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析,应置4℃下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。

4. 标本运输:室温运输。

5. 标本拒收标准:

细菌,经血,白带,精液,粪便污染标本不能作测定。

6. 试剂

6.1 试剂名称:Combur10 TestR M

6.2 试剂厂家:德国 Roche 诊断试剂公司

6.3 包装规格:100Test/kit

6.4 试剂盒组成:试纸条:100

6.5 试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存于2-30条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。

7. 仪器设备

7.1 仪器名称:罗氏尿液分析仪

7.2 仪器厂家:Roche

7.3 仪器型号:MiditronR Junior II

7.4 仪器校准程序:在使用过程中,一般是两周校准一次,如超过此期限,仪器会提示“

Please Calibrate”(请校准)。通过测定内部参比块,环境温度和光学系统的改变都可被补偿。当条件改变很大时,比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗,仪器将打印出一个错误信息;校准条是有稳定特征的灰白色试条,这些校准条只能使用一次。校准前,应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为:在“READY<START>”显示时,按<Calibrate>键,放上校准条。再按<Calibrate>键,校准条被送入机器内,屏幕显示“Calibrating”(正在校准),约一分钟后,标准结果将被打印出。“Calibrating O.K”,表示校准成功。

8. 操作步骤:

8.1 <START>键,显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。

8.2 4秒钟后,显示“Dip Strip 1”,同时绿灯闪烁,将试条浸入尿样中。

8.3 当显示“Insert Strip 1”,把试条放在试条托盘上,此时绿灯亮,若要人工输入颜色,按<Color>键,再按<Set>键,选择相近的颜色,最后按<Enter>键确认,同样也可人工输入浊度。

8.4 20秒后,显示“Dip Strip 2,然后重复以上过程。

8.5 每一个测量完成后将自动打印出结果。

9. 结果判断:不变色(0mg/L),浅棕色(0.5 mg/L),黄棕色(1.5 mg/L),棕色(4.0 mg/L),深桔色(>80 mg/L)

10.

质量控制:质控尿液的应用:用人工质控尿液进行空内质控,低浓度质控液应为(-),高浓度质控液应为(+)。

11. 参考范围:阴性或弱阳性,120稀释后阴性

12. 临床意义:

12.1 正常人为弱阳性反应,尿液稀释20倍后多为阴性。

12.2 尿胆原阴性常见于完全阻塞性黄疸。

12.3 尿胆原增加常见于溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎。

13. 操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,重复性好。

14. 方法局限性

14.1 由于醛反应快速,应在规定时间内观察结果

14.2 卟胆原,内生性吲哚,黑色素原可造成假阳性。

14.3 阳性反应时稀释的方法同改良Ehrlich

14.4 尿液要新鲜。

15. 注意事项:

15.1 阳性程度与饮水量有关,夜间和上午排泄较少,午餐后迅速增高。而且尿胆原的清除率与尿液PH有关,PH5.0时,排泄率为2ml/min;而为8.0时,排泄率为25ml/min。测试前应嘱患者口服少量NaHCO3使尿液碱化,留取午餐后2-4时尿液做尿胆原定性。检测前再以乙酸调节PH至弱酸性。

15.2 若尿胆原定性阴性,可加做尿胆素定性试验予以验证,以免因标本久置造成假阴性。

15.3 长期应用抗生素可抑制肠道菌群,严重腹泻也会影响胆红素转变为尿胆原,造成结果阴性。长期便秘使尿胆原过度吸收,定性时阳性程度增高,分析结果时应注意。

16. 当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:当检验系统(仪器)不能工作时,可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。


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