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高效液相色谱仪色谱柱的填料及正相色谱柱的使用方法

2020.1.08

高效液相色谱仪色谱柱的填料:
    在填料和流动相之间进行液相色谱柱分离。液相色谱柱的分类取决于填料的类型。
    正相柱:硅胶主要用作柱填料。按形状可分为无定形和球形两种,其粒径在3-10um之间另一种正相填料是硅胶表面键合-CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶
    反相柱:硅胶表面结合十八烷基官能团(ods)的非极性填料。也有无定形和球形的差异。其他常用的反填料有粘结的C8、C4、C2、苯基等,粒径在3-10um之间。
    高效液相色谱仪正相色谱柱的使用方法:
    新立柱可直接用于流动相建议用正己烷乙腈(99:1)在0.5ml/min流速下冲孔10倍柱体积然后根据流动相选择极性相近的氯仿或二氯甲烷在相同流速下冲孔10倍柱体积后用流动相代替流动相。
    当采用正相时,不适合分析含有醛固酮和羰基的化合物,不应用于还原糖的分析。流动要完全汽化,不能含有羰基化合物和过氧化物(质量较差的乙醚和少量四氢呋喃)。
    无论何时更换流动相,都必须确保新的流动相和柱的原始保存液是相互溶解的。

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