CWL-M高效液液萃取机顶空液相微萃取-气相色谱法
采用CWL-M高效液液萃取机液相微萃取与气相色谱联用技术测定阿奇霉素中二氯甲烷和丙酮的残留量。以苯乙酮为萃取溶剂，萃取时间30 min，萃取温度60℃，萃取液滴体积2μL。在浓度为20.0μg/g~120. 0μg / g范围内，二氯甲烷的外标曲线为Y =0.009 9X -0. 088 2，相关系数R² = 0.983 1;丙酮的外标曲线为Y = 0. 029 1X - 0. 040 5，相关系数RZ = 0. 9865;阿奇霉素中丙酮测定结果的相对标准偏差(RSD%)为1. 19，加标回收率为93. 49%一101.1%;方法的最低检测限:二氯甲烷为0.298μg/g，丙酮为0. 059μg/g。
阿奇霉素是治疗敏感细菌所引起的感染常用药物。由于药品在生产过程中引入了有害的有机溶剂二氯甲烷和丙酮，因此必对成品药进行有机溶剂的残留量检测，保证用药的安全性川。液相微萃取是1996年发展起来的一种新型样品前处理技术，该技术具有富集、效果好、集采样、萃取和浓缩于一体、灵敏度高、操作简单、快捷、廉价、所需有机溶剂少等优点Cz7。本文采用顶空液相微萃取一气相色谱联用技术测定阿奇霉素中二氯甲烷和丙酮含量。
1.实验部分
1.1仪器与试药
GC112A气相色谱仪，火焰离子化检测器，5μL微量进样器，DF一II集热式磁力加热搅拌器;二氯甲烷、丙酮、苯乙酮(均为分析纯)，阿奇霉素(医用品)。
1.2液滴保护管的制作
取用一内径约1 mm的聚四氟乙烯管1. 5 cm，用小刀片将其表面割成八条均匀平行的条状孔，使其内的有机溶剂与顶空瓶中的标准溶液能有充足的接触面积而又不发生掉落，与微量进样器相连的一端再插入一内径更小的胶管，使微量进样器插入后有较好的密封性。
1.3标准溶液的配制
量取0. 15 mL二氯甲烷、0. 25 mL丙酮和0.2gOP一10乳化剂至100 mL容量瓶内，振荡摇匀，加水定容。取此溶液1 mL至另一100 mL容量瓶中，加水定容，得到二氯甲烷、丙酮浓度分别20μg / mL的水溶液。
1.4基体物质的制备
取4. 0 g阿奇霉素样品，打开胶囊将其中的粉末置于小烧杯中，放置80℃烘箱内烘8h，以去除丙酮和二氯甲烷，此白色粉末供空白基体用。
1.5气相色谱条件
色谱柱:2 m x Φ3 mm i. d.不锈钢柱，内填充po-rapack P (80一100);柱温:15 8℃;恒温1 min，以40℃ /min升温至180℃，恒温15 min ; FID检测器，氮气作载气，流速:35 mL/min ;氢气流速:40 mL / min ;空气流速:300 mL / min。
1.6外标曲线的制作
分别量取二氯甲烷和丙酮的20 μg / mL标准溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mL于6个15 mL顶空瓶中，加5 mL蒸馏水，再分别加入2 g NaCI和0. 5 g药物空白基体，放入磁搅拌子。使用5 μL微量注射器抽取2μL苯乙酮，将微量注射器的针尖置于样品的顶空中，小心推动注射器活塞使萃取溶剂悬在注射器的针尖上，暴露于样品的顶空中，在萃取温度为35℃下萃取20 min后，将萃取溶剂液滴吸回注射器，并将注射器针头从顶空瓶中移出，完成萃取，然后进样进行气相色谱分析，制作色谱峰高与浓度的关系曲线。
1.7样品分析
取0. 50 g阿奇霉素样品于15 mL顶空瓶内，加5mL蒸馏水，再向瓶内加入2 g氯化钠和磁搅拌子，其它步骤同1. 6节。根据色谱峰高，通过外标曲线得到样品阿奇霉素中丙酮和二氯甲烷的浓度，并计算出样品阿奇霉素中二种溶剂的残留量。
2.结果与讨论
2.1萃取液的选择
选择合适的有机溶剂是提高分析物灵敏度的关键，其选择的基本原则是“相似相溶原理”，即溶剂的性质必须与分析物的性质相匹配，才能保证溶剂对分析物有较强的萃取富集能力。
本实验在相同的色谱条件、萃取时间、萃取温度的条件下，在分析二氯甲烷和丙酮时，分别对苯乙酮、环己酮、苯甲酸乙酷、十四烷有机溶剂为萃取溶剂进行了考察。结果发现环己酮粘度较大，易于形成液滴，但由于与水易形成轻基，对分析物吸附效果较差。苯甲酸乙酷易挥发，液滴不稳定，吸附效果也较差，被测物峰面积与浓度的线性关系不好。十四烷粘度小，不易成球状，对被测物吸附效果差。苯乙酮具有较好的物理性能，被测物峰高与浓度的线性关系良好。因此本试验选择苯乙酮作为样品中二氯甲烷和丙酮测定的液相微萃取溶剂。2. 2液滴体积的选择
分别用5μL微量进样器取1,2,3μL苯乙酮，在60℃萃取30 min，通过比较色谱峰高及萃取状况，1μL的液滴萃取效率差，3μL液滴容易掉落，2μL液滴较适合。
2. 3气一液平衡时间的影响
分别量取含有二氯甲烷和丙酮的标准溶液2. 5mL于5个15 mL顶空瓶内，加蒸馏水至5 mL，再分别加2g氯化钠和基体物。使用5μL进样器抽取2μL苯乙酮作为萃取有机溶剂，分别萃取10,15,20,25 , 30 min后，进行气相色谱分析，以峰高与时间作图，得到最佳萃取时间。
图1表明了二氯甲烷和丙酮的色谱峰高与萃取时间的关系。
结果表明，二氯甲烷和，丙酮的萃取气一液平衡最佳时间均为20 min 。
2. 4标准曲线
根据1.6节操作得到的实验数据，以峰高对应的浓度制作标准曲线，得出回归方程。
二氯甲烷的标准曲线见图2;丙酮的标准曲线见图3。
线性回归方程为Y=0.029 1X一0. 040 5，相关系数R²= 0. 986 5 。
2. 5样品分析结果选取市售阿奇霉素药品进行分析测定，结果见表1.
2. 6加标回收率
向15 mL顶空瓶中加入不同量的丙酮标准溶液，加蒸馏水至5 mL，再向顶空瓶中加入0.500 0 g被测样品和2. 0 g氯化钠。根据公式计算回收率。计算公式为:
回收率=(ma-mi) /m标x 100 %
式中:ma一加入标准物质后测定量
mi一样品中被测物的原有量
m标一加入标准物质的量
2. 7最低检出限
实验中，色谱基线噪声值0. 01 mV，3Y = 0. 03mV，由外标曲线方程Y=kX+b得到丙酮最低检测限理论值为0. 242μg / g，配制丙酮浓度为0. 2μg/g的样品，经过气相色谱分析得到其色谱峰高为0. 102my，通过比例关系0. 102/0. 03 =0. 2/C (C为丙酮的最低检测限)，可求出C = 0 . 059 μg / g，即丙酮的最低检测限为0.059μg/g。同理，二氯甲烷的峰高为0. 021 mV，可求出二氯甲烷的最低检测限为0. 286μg/g。
使用苯乙酮为萃取剂，通过顶空液相微萃取一气相色谱联用技术来测定阿奇霉素中二氯甲烷和丙酮的含量，方法简便易行，结果准确可靠。
