高速液相色谱方法解析
在生物工程中,作为代谢产生的物质群种在分离、精制过程中,生理物质容易失去活性,而且被分离物的分布范围甚广,如在水相溶液中时,性质相类似的蛋白质、氨基酸、核酸(DNA、NRA),抗体以及含有遗传基因结构的生物物质,用通常的化学方法很难进行分离。
80年代中期,采用高速液相色谱方法,便有效地解决了这一困难,显示了多孔玻璃作为液相色谱新填充介质的良好特性和应用前景。
该法是利用多孔玻璃作为载体填充到色谱柱中,在分离液高速通过时,流过的物质可因分子量大小不同而分离开来。
多孔玻璃由于具有纳米级的细孔,且孔径分布窄,微孔结构均匀,同时耐微生物的侵蚀,所以能够取得良好的分离效果。
一般情况下,载体孔径越大,物质在其中滞留时间越短,流出速度就越快,反之,分子量大的物质滞留时间长,流出速度就慢。
由于新制得的多孔玻璃内孔常堆积有无定形硅胶,使多孔结构不规则,表面特性差,为了提高其分离效果,常常需要将制得的多孔玻璃进行某些修饰处理,例如用 碱除去某些无定形硅;或将其硅烷化、氨基化、醛基化、酸基化等,使其表面改性,正确控制多孔玻璃载体的孔径是获得良好分离效果的重要因素,而表面烷基化修 饰处理,则有助于重现性的提高。
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