噬菌体抗体库技术的基本原理和程序
将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体,转染工程细菌进行表达,然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆噬菌体抗体。
利用这一技术可以得到完全人源性的抗体,在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。
基本原理和程序:
构建噬菌体抗体库通常包括以下几个过程:
1.从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞,提取mRNA并反转录为cDNA;
2.应用抗体轻链和重链引物,根据建库的需要通过PCR技术扩增不同的Ig基因片段;
3.构建噬菌体载体;
4.表达载体转化细菌,构建全套抗体库。
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