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高效液相色谱法与经典液相色谱法的主要区别

2022.3.01

一、类型不同

1、高效液相色谱法

1)吸附色谱法(Adsorption Chromatography)

2)分配色谱法(Partition Chromatography)

3)离子色谱法(Ion Chromatography)

4)分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatography)

5)键合相色谱法(bonded-phase chromatography)

6)亲和色谱法(Affinity Chromatography)

2、经典液相色谱法

1)吸附色谱法

吸附色谱法的固定相为吸附剂,色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的,不进入固定相的内部。

2)分配色谱法

这种色谱的流动相和固定相都是液体,样品分子在两个液相之间很快达到平衡分配,利用各组分在两相中分配系数的差异进行分离,类似于萃取过程。

3)离子交换色谱

离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换,由于各组分离子的交换能力不同,从而达到色谱的分离。

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二、特点不同

1、高效液相色谱法

①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。

②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。

③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

2、经典液相色谱法

以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。

三、应用不同

1、高效液相色谱法

由于高效液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域,并已成为解决生化分析问题最有前途的方法。

2、经典液相色谱法

液相色谱是常温操作,不受样品挥发度和热稳定性的限制,它非常适合相对分子量较大,难汽化,不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析,大约占有机物的70%~80%。


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