毛细管电泳色谱仪进样方式归纳
毛细管电泳色谱仪进样方式有电动进样、压力进样和扩散进样。
一、电动进样:
1、方法:
在毛细管的阳极端接触缓冲液前,先置于样品溶液中,并在很短时间内加进样电压,使样品通过电迁移进入毛细管。
2、特点:
(1)对毛细管内的填充介质没有特殊限制,属普适性进样方法,可实现自动化操作。
(2)进样装置简单,不需附加设备,介质粘度很高时使用更有利。
(3)电动进样是毛细管凝胶电泳的*进样方式。因为在凝胶状态下,压力进样和扩散进样都很困难。
(4)可用于痕量富集。但样品溶液的离子强度必须保持恒定,否则在该点的电压会急剧变化。
二、压力进样:
压力进样是最常用的进样方式。
1、方法:
(1)进样端加压:
采用压缩空气(钢瓶气)可实现正压进样,并可与毛细管清洗系统共用。多采用。
(2)出口端抽真空:
负压进样需要特别精密的控制设计,容易因泄露等原因出现不重复进样。
(3)虹吸:
调节进样槽和出口槽之间的相对高度使之产生虹吸作用,将样品引入。
2、特点:
(1)若严控样品粘度和温度,则进入毛细管的样品质量恒定。
(2)在进样中没有组分歧视。
三、扩散进样:
1、方法:
利用浓度差扩散原理,当将毛细管插入样品溶液时,样品分子因在管口界面存在浓度差而向管内扩散。
2、特点:
(1)对毛细管内的填充介质没有任何限制,属普适性进样方法。
(2)扩散进样具有双向性。在样品分子进入毛细管的同时,区带中的背景物质也向管外扩散,可得到畸变程度较小(与背景差别不大)的初始区带,能抑制背景干扰,提高分辨率。扩散与迁移速度和方向无关,可抑制进样偏向,提高定性定量的可靠性。
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