薄层层析分离中的薄层板制作是指将经离心机处理后的固定相支持剂均匀地涂布在玻璃板上形成薄层。玻璃板要求表面平滑、清洁，大小按需要选定。

一、干板制作：

干板是将不加粘合剂的支持剂干粉均匀地涂布在玻璃板上制成的薄层板。干板制作简单，展开快，但极易吹散。制作方法如下：

1、选直径约为50mm的玻璃管一根，根据薄层的厚度（一般为0.4～1mm）在其两端绕胶布数圈。

2、将支持剂干粉倒在玻板一端，固定玻璃板一端以防玻璃管推进时移动。

3、把玻璃管压在玻璃板上，将支持剂干粉由玻璃板一端推向另一端，即形成薄层。

二、湿板制作：

湿板是将支持剂加粘合剂和水或其它液体后均匀地涂布在玻璃板上，经烘干而成的薄层板。下面介绍三种制板方法：

1、玻璃棒涂布：

将支持剂用水或适当溶剂调成胶浆，倒在玻璃板一端，然后按干板的制作方法，用玻璃棒将支持剂由玻璃板一端推向另一端，即形成薄层。

2、玻璃片涂布：

将支持剂用水或适当溶剂调成胶浆，倒在玻璃板一端，然后按干板的制作方法，用玻璃片将支持剂由玻璃板一端推向另一端，即形成薄层。

3、倾斜涂布：

将支持剂胶浆倒在玻璃片上，然后将玻璃板倾斜，使胶浆均匀涂布在玻璃板上。

用上述任何一种方法将支持剂均匀涂布在玻璃板上后静置片刻，待薄层表面无水渍后置烘箱中，温度升至100℃后持续1小时，关闭电源，待温度降至接近室温时，取出薄层板放入干燥器，此步骤称为活化。