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蒸发光散射检测器(ELSD)的设计/工作原理(一)

2020.5.25

蒸发光散射检测是目前中药材检测中常用的分析仪器,它是2015版药典标准黄芪甲苷检测必不可少的仪器之一。

蒸发光散射检测器(ELSD)工作原理

一、蒸发光散射检测器(ELSD)的设计原理:

在辅助气体作用下,将流动相雾化,形成的液雾(雾珠)通过加热而蒸发,此时溶解在流动相中不易挥发的样品即形成颗粒物,这些颗粒物由辅助气体推动进入光束通道,造成光束散射。通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量,从而测定样品浓度。

二、蒸发光散射检测器(ELSD)基本结构:

依据ELSD的设计原理,ELSD的结构由三大部分组成:即雾化雾珠处理,蒸发和散射光检测。 第一步:雾化过程,也称为喷雾过程。流动相与辅助气混合,在辅助气的压力作用下从一小孔中喷出而形成浓雾,整个装置称为喷嘴或称雾化器。流动相雾化后形成的液雾(雾珠)由于均匀性及一致性差,因此必须进行处理,否则影响某其有效蒸发。此过程称为分流。依据不同的分流方式,ELSD经历了三代发展。即限流器分流技术时代,撞击器及低温分流技术时代和热分流技术时代。在第二代分流技术时代,依据所使用的分流技术不同,出现了两大类的ELSD,即常说的A型和B型。A型ELSD以撞击器分流技术设计,可以实现分流和不分流两种操作模式;B型ELSD,以低温分流技术设计,只能实现分流操作,但由于其雾珠处理利用颗粒粒度方式分流,因而实现了低温挥发,特别有利于半挥性化合物的测定及高水相流动相的应用。

A、B类型其区别在于:类型A的操作是全部柱流出物都进入直的漂移管,让流动相在其中蒸发;类型B的操作是把柱流出物通过一个弯管,在此管中大的颗粒沉积下来流入废气管,其余的小颗粒进入螺旋状的蒸发管。Wilcox考察了这两种类型的ELSD,他认为类型A的ELSD把所有的气溶胶都送到漂移管中,为了有利于蒸发常常使用较高的操作温度,因此它适合于检测不挥发的样品,使用流速为1.0ml/min(或更低流速)的挥发性流动相进行分析。类型B的ELSD将大颗粒气溶胶撞在弯曲管管壁上除去,使气溶胶粒度分布变窄,在较低的温度下易于蒸发,适合于检测半挥发性样品,以流速为1.5ml/min(或更高流速)的高含水流动相进行分析。

第二步:蒸发,经过第一部处理的雾珠进一步流向经加热处理的区域,此时雾珠在热的作用下不断挥发形成气体,挥发性差的样品从流动相雾珠中析出而形成颗粒物。这一装置称为蒸发区或漂移管。漂移管也有两种设计方式,即螺线管式和直管式设计。螺线管有更长的漂移距离,能更好的实现蒸发,但随着流动相所经距离的延长,峰形变宽,灵敏度降低,且漂移管不方便维护,而直管则有更窄的峰,相对灵敏度提高,且维护方便。

第三步:检测,监测区由光源和光检测器组成,光源经光学处理后形成一束光,穿过漂移管末端口,气体经过光束时,不会影响光的穿透,而当样品颗粒经过时,光即产生散射。散射出来的光照在90度位置上的光检测器即产生广电信号。在这里,光源有激光器、LED和钨卤灯。

激光器:光源强度大,发热少,结构简单,无需特殊光学聚光文件。寿命长。
LED:发热少,结构简单,强度弱,须进行聚光等光学处理。
钨卤灯:发热大,强度弱,须进行聚光等光学处理,波长范围宽。
散射监测器其实应与光源配合使用,对于激光器,由于光强度大,其散射光强度也强,常用光电二极管作为检测器,而对于光强较弱的光源,必须使用光电倍增管作为检测器。
光电二极管:结构简单,体积小,无特殊供电路,故障率低。
光电倍增管:体积较大,需供高压,故障率高,放大倍数可控制,可检测低强度光。

三、 ELSD特征:

依据ELSD原理,ELSD是一类广谱性、通用型质量检测器,几乎所有挥发性低的化合物均可被检测,且ELSD是质量型检测器,只与待测物的量有关,而与其光学特性,电化学特征及化合物本身的组成无关。

四、蒸发光散射检测器(ELSD)的检测原理

尽管ELSD有两种检测模式,但其检测原理是相同的。Charlesworth奠定了ELSD检测的理论基础。Mengerink等系统地总结如下:

1)雾化   色谱柱流出进入雾化器后,与充入的气体混合形成液滴,液滴的平均直径D0可以用Nakiyama和Tanasawa提出的公式计算:
D0=0.585×Sqr(σ)/( Δμ*sqr(ρ))+212(η/σ*ρ)^0.45*((1000×FL/Fg)^1.5)
其中D0为表面积体积平均直径(μm),为洗脱液的表面张力(N/m);Δμ为液体和气体之间的线速差(μm/s);η为柱流出物的粘度(Pa.s);ρ为柱流出物的体积质量(Kg/m);FL/Fg为柱流出物与气体的流速比。最初的液滴直径分布为高斯分布或非对称的正态分布。


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