胰酶消化一个T25瓶的sf9细胞
1. 去除培养基。
2. 用2ml 1xPBS(足以覆盖细胞表面)洗涤细胞,去除PBS。
3. 加入2ml 1x胰酶EDTA(恰好覆盖细胞表面)。
4. 37 ℃孵育5到10分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。
5. 向细胞中加入2ml 细胞培养液,移入锥形管,用2ml培养液洗瓶壁,移入同一锥形管中。(培养基中的FBS终止了胰酶的活性。)
6. 离心(1100rpm)沉淀细胞。去除培养基。
7. 用新的培养基重新悬浮细胞。传代。
推荐
1. 去除培养基。
2. 用2ml 1xPBS(足以覆盖细胞表面)洗涤细胞,去除PBS。
3. 加入2ml 1x胰酶EDTA(恰好覆盖细胞表面)。
4. 37 ℃孵育5到10分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。
5. 向细胞中加入2ml 细胞培养液,移入锥形管,用2ml培养液洗瓶壁,移入同一锥形管中。(培养基中的FBS终止了胰酶的活性。)
6. 离心(1100rpm)沉淀细胞。去除培养基。
7. 用新的培养基重新悬浮细胞。传代。