1、应用范围

此试剂盒可用于人血清和血浆中褪黑激素的体外定量检测。

2、前言说明

松果体因其在光周期现象中的重要作用，已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到最高。褪黑激素特有的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息，如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用，它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。据报道，褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致，如：失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素，之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。

3、实验原理

此ELISA试剂盒利用的是竞争法的原理。生物素和非生物素标记的抗原竞争性结合包被板上有限的抗体结合位点。生物素抗原结合到抗体上的量与样品中抗原的量成反比。系统达到平衡后，洗板除去游离的生物素抗原，结合到抗体上的生物素抗原可以用抗生物素碱性磷酸酶标记物和对硝基苯磷酸底物检测出来。用已知的标准品数据做一条标准曲线，将未知样品的酶活性与标准曲线进行比较就可以定量出未知样品的量。

4、储存与稳定性

试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述,如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它样品的提取或储存于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用4次。

5、样品的采集与储存

血清，血浆（EDTA，肝素）

6、试剂盒成分

7、实验所需器材但试剂盒不提供

1）移液器，体积：50; 500ul

2）试管（12×75mm）

3）轨道振荡器（400-600rpm）

4）旋涡混合器

5）带储器的8道移液器

6）洗涤瓶，自动或半自动洗板机

7）离心机（冷冻离心机更适宜）：200-500×g，也可选用多头抽真空装置（例如：Mallinekrodt-Baker 或Waters）。

8）甲醇（HPLC级）

9）蒸发离心机

10）            可在405nm处读数的酶标仪（参考波长600-650nm）

11）            蒸馏水或去离子水

12）            吸水纸、取样吸头和计时器

8、实验前的准备说明

8.1冻干或浓缩成分的准备

如果溶液的需要量比较大,应该将试管内的溶液混合.避免反复冻融。