通道载玻片--新的免疫荧光方法
细胞的免疫荧光实验是一个基础的细胞实验,传统的方法是在培养板中放入预先处理好的盖玻片,待细胞贴壁后,使用镊子将盖玻片拿出再开始进行固定,染色等系列工作。
现在分享一种简便的免疫荧光方法,无需爬片,培养-操作-镜检,在一个培养皿/载玻片上完成所有工作!一气呵成!
使用如图的培养皿和载玻片,免疫荧光步骤将简化为:
1.直接细胞培养
2.冲洗玻片/培养皿
3.固定细胞
4.冲洗玻片/培养皿
5.染色
6.冲洗玻片/培养皿
7.冻存液处理细胞
8.直接镜检观察
免去了指甲油封片的传统免疫荧光方法中的冗长步骤:
1.无需对盖玻片和载玻片消毒灭菌
2.无需对盖玻片进行包被
3.无需等细胞爬片
4.无需指甲油封片
之所能如此简便完成免疫荧光实验,是因为这些ibidi培养皿和载玻片的底部为特殊处理的材质,绝大多数细胞可以直接贴壁生长,而不需要另外包被。同时,这些耗材的底部薄如盖玻片,可以直接使用倒置显微镜进行观察,得到高质量的成像,适用于显微镜比如共聚焦显微镜。
步骤:培养-固定-染色-镜检,只需在这个载玻片上进行4个步骤,免疫荧光实验轻松完成~
优点总结:
1、节约细胞和试剂
ibidi通道载玻片里的通道只有400μm高,以μ-slide VI为例,通道的容积只有30μl,而普通8well的腔式载玻片一个孔的容积有300μl。这意味着通道需要的试剂和细胞量仅需约十分之一!对于非常珍贵的细胞和试剂来说,这可是非常重要的。
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