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双向电泳操作步骤——组织来源的蛋白质样品的溶解和制备

2019.3.28

实验材料	蛋白质
试剂、试剂盒	SDS 尿素
仪器、耗材	离心管转子
实验步骤	1. 称重后将样品加入Dounch匀浆器。每100 mg 组织加入1.5~2.0 ml SDS/或尿素/溶解缓冲液，用B号研棒冲击50次，然后以A号研棒冲击50次。 2. 放置几分钟后，取一小份样品于200 ul 离心管100 000 g 离心2 h 以上或在200 000 g 以上离心1 h。保留上清（蛋白样品）。加样于第1向凝胶上。
注意事项	在离心前，样品在SDS/溶解缓冲液中煮沸5 min，千万不要在尿素/溶解缓冲液中加热样品。在第1向电泳前离心样品。

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