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怎么判断磁珠法核酸提取仪提取磁珠的稳定性?

2020.8.03

  核酸提取磁珠又称为DNA提取磁珠,RNA提取磁珠,硅基磁珠,是生物磁珠的一种,其原理是采用稳定的高分子材料作为分离载体,引入磁性,再偶联上配基,形成含有磁性粒子的高分子微球。核酸提取磁珠适用于各类生物检材的DNA、RNA提取,目前已广泛应用于植物、动物、全血、血清、口腔拭子、唾液、干血片、细菌、质粒、法医样本等检材的核酸提取,配合全自动核酸提取仪可实现高通量的DNA自动化提取。

  主要从以下几个方面判断其稳定性:

  1、磁响应时间

  磁响应时间是指核酸提取磁珠放置于磁力架后,完全磁分离的时间,磁响应时间不应过长,太长的磁响应时间会使等待时间变长,降低操作体验。一般来讲,吉恩特磁珠的磁响应时间以30秒以内为宜,其他磁珠的时间最长不能超过60秒,因此,我们在选择核酸提取磁珠的时候,要首先测试磁珠的磁响应时间,根据实验要求,选择磁响应时间合适的核酸提取磁珠。

  2、半沉降时间

  半沉降时间一般用来表示核酸提取磁珠的悬浮性或分散性,理论上来讲,半沉降时间越长,磁珠的悬浮性越好,连续加样的稳定性就越高,按经验来看,半沉降时间一般应在10分钟以上,最短时间也不能低于5分钟,否则,磁珠的沉降速度会很快,需要在加样的时候,增加核酸提取磁珠的混匀频率,以免由于混匀程度不够,造成磁珠加样量的不均一,从而使提取结果差异较大。因此,选择半沉降时间适中的核酸提取磁珠,也会增加实验的稳定性。

  3、重悬性

  重悬性是指核酸提取磁珠完全沉降后(自然沉降),再次回到完全悬浮状态的难易程度,这项参数经常被使用者忽略,也是造成实验结果不稳定的重要因素之一,重悬性的好吉恩特磁珠,即使完全沉降数小时,数天,数月后,稍加用力混匀即可回到完全悬浮的状态,而有些核酸提取磁珠,沉降数分钟后,重悬的难度就非常大,这样的磁珠在使用时,很难保证是否处于完全悬浮的状态,从而造成加样量的不均一,直接影响实验结果的稳定性。因此,核酸提取磁珠的重悬性应作为判断稳定性的重要因素之一。

  4、吸附效率的稳定性

  吸附效率的稳定性是指核酸提取磁珠回收已知浓度DNA的回收效率,这个数值应该是一个绝对值,有些使用者喜欢进行吸附量的测试,而不是回收效率的测试。然而,吸附量并没有标准的参考,是一个相对值,受样品的新鲜程度,试剂与磁珠的兼容程度,试剂的稳定性,磁珠的稳定性等多种因素影响,也许好的试剂体系能够容忍稳定性差的磁珠,而差的试剂体系,对于稳定性好的磁珠来讲,确实有失公正,容易得出有偏见的结论。因此,回收效率的测试是判断核酸提取磁珠稳定性的良好办法,这里需要强调一点,回收效率并不能说明磁珠的吸附量,只能用于判断核酸提取磁珠的稳定性。

  文章链接:仪器设备网 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-805.html


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