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免疫共沉淀操作要注意哪些问题?

2022.3.28

  (1)细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定,不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂

  (2)使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用

  (3)使用对照抗体,单克隆抗体用正常小鼠的IgG或另一类单抗,兔多克隆抗体用正常兔IgG

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