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PCR 检 测 细 胞 因 子 m R N A 的表达

2019.4.07

实验步骤


基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平

材 料

内参照:转 录 质 粒 载 体(含有临床生物检测标本相关的c D N A )

胍盐溶液

50 U/ul RNasin

5 X 反转录酶缓冲液

0.5m g / m l olig (d T )16

l m g /m l 乙酰化的B S A

4d N T P 混合液

200U /ul M o - M u L V 反转录酶

1 〇 X 无 M g C l 2 P C R 扩增缓冲液

扩增引物: 20umol/l 5’端 和 3’ 端 目 的 细 胞 因 子 特 异 性 引 物(表 1 4 . 5 . 1 和表14. 5. 2)

5U /ul Taq D N A 聚合酶

矿物油

含 有 I ug /m l 溴化乙锭的 3 % 琼 脂 糖 胶(m /V ) (附录 1)

D N A marker

13m m X I O O m m 组织研磨器

1.5m l 和 0.5m l 离心管,高压灭菌

65°C 和 39°C 水浴

注意 :当处理人血细胞或者传染物时,必须按照生物安全程序(前言)进行




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