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Azure总蛋白仪与内参的可靠性比较

2020.8.17

  目前,多个主流期刊和免疫印迹专家提出了看家基因已经不适合作为内参使用了。因为大多数看家基因都是高丰度蛋白,其产生的信号大多都会接近线性动态范围的上限,当我们在检测低丰度蛋白的时候,往往蛋白的上样量会很大,易造成信号过饱和,这时候常见的内参产生的信号已经不能正确反应上样量的差异了。并且研究发现一些看家基因的表达并不是恒定的,它会随着发育阶段的不同等因素产生变化,所以使用看家基因的定量并不可靠。

  此外,一些杂志直接提出了内参和目的蛋白要在同一张印迹膜上,甚至直接提出最好选用总蛋白进行归一化,如果使用看家蛋白,则需要提供看家蛋白表达稳定并且不受实验条件影响的证据。


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