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化学发光特点

2018.3.02

极高的灵敏度,荧光虫素(LH2)(luciferin)、荧光素酶(luciferase)和磷酸三腺苷(ATP)的化学反应可测定2×10-17 mol/L的ATP,可检测出一个细菌中的的ATP含量。 2.由于可以利用的化学发光反应较少,而且化学发光的光谱是由受激分子或原子决定的,一般来说也是由化学反应决定的。很少有不同的化学反应产生出同一种发光物质的情况,因此化学发光分析具有较好的选择性。
3.仪器装置比较简单,不需要复杂的分光和光强度测量装置,一般只需要干涉滤光片和光电倍增管即可进行光强度的测量。
4.分析速度快,一次分析在1 min之内就可完成,适宜自动连续测定。
5.定量线性范围宽,化学发光反应的发光强度和反应物的浓度在几个数量级的范围内成良好的线性关系。
分子发光分析法 - 基本原理

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分子发光分析法基本原理
化学发光是基于化学反应所提供足够的能量,使其中一种产物的分子的电子被激发成激发态分子,当其返回基态时发射一定波长的光,称为化学发光,表示如下

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化学发光包括吸收化学能和发光两个过程。为此,它应具备下述条件: 1化学发光反应必须能提供足够的化学能,以引起电子激发。
2要有有利的化学反应历程,以使所产生的化学能用于不断地产生激发态分子。 3激发态分子能以辐射跃迁的方式返回基态,而不是以热的形式消耗能量。
化学发光反应的化学发光效率ΦCl,取决于生成激发态产物分子的化学激发效率Φr利激发态分子的发光效率Φf这两个因素。化学发光的发光强度ICl以单位时间内发射的光子数来表示,它等于化学发光效率ΦCl与单位时间内起反应的被测物浓度CA的变化(以微分表示)的乘积,通常,在发光分析中,被分析物的浓度与发光试剂相比,要小很多,故发光试剂浓度可认为是一常数,因此发光反应可视为是—级动力学反应,此时反应速率可表示为式中k为反应速率常数。由此可得:在合适的条件下,t时刻的化学发光强度与该时刻的分析物浓度成正比,可以用于定量分析,也可以利用总发光强度S与被分析浓度的关系进行定量分析,此时,将式(5-7)积分,得到如果取t1=0,t2为反应结束时的时间,则得到整个反应产生的总发光强度与分析物的浓度呈线性关系。

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