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缓冲盐对基线噪音的影响

2018.7.02

缓冲盐对基线噪音的影响

在反相液相色谱中常用的缓冲盐主要包括磷酸盐,醋酸铵,甲酸胺,碳酸氢铵,等。其中磷酸盐以其耗费低,纯度高,缓冲pH范围宽(2-3.1,6.2-8.2),背景吸收低等特点,成为使用最多的盐类;而醋酸铵,甲酸胺,碳酸氢铵等可挥发性盐,则可与MS兼容。


如下图9A与9B所示,使用磷酸盐的时候,其色谱基线特征为在低检测波长下,基线上移,且上移程度与使用的有机相的截止吸收波长有关。此外在使用大于10 mM的磷酸盐的时候,有机相比例较高的条件下,优先选用甲醇作为有机相。

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对于醋酸铵等高紫外吸收的缓冲盐,其基线的形状与流动相的配置方式、组成以及使用的检测波长有关,如下图10所示。

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只在水相中添加醋酸铵缓冲盐时,随梯度的运行,在低检测波长下,基线整体形状下移比较严重;当在水相以及有机相中各添加等量醋酸铵缓冲盐时,在低检测波长下,基线的整体形状向上漂移,其程度较前者漂移小。


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