三十五.我现在正在做拉曼光谱试验，用金金属做底物，分析：CNBP(4-Cyanobiphenyl)和Cyclodextrin如何镶嵌在一起，用检测CNBP在金金属底物上的角度和方向，平行还是垂直，来确定是否进入到Cyclodextrin里面，制备金属底物需要购买金属板，用硫酸洗，在用氮气吹平，进行粗糙化，但，我不知道配好的金属胶体溶液和金属底物之间有什么关系，我刚做完金属胶体溶液，进行紫外光谱测定波长为520纳米，就是不知道下一步该怎么做？

自组装下，用双头试剂。

三十六.求助拉曼光谱选择扫描范围和激发波长，我作了个样，用拉曼光谱表征，物质为硅胶负载有机物（对甲苯磺酸盐类），但好像荧光比较明显，干扰大，检测老师叫我提供扫描范围和激发波长。

1.不知道你都做过什么激发波长的，633 nm应该没有什么问题吧，要是有785 cm的更好了，波长长了能量低了，就打不出荧光了。可以先采一个全谱，然后在选范围。我见过有人做催化的以630 cm为中心采谱。我没做过催化，很外行了。

2.一般是4000～0 cm⁻¹，激发波长是1064 nm，Nd：YAG激光器。

3.如果含有机物，不提倡选用785 nm，因为，在这个激发波长下，有机分子共振效应很弱。

①激光波长514 nm，量程：100～9400波数；

②激光波长633 nm，量程：100～5700波数，建议选用514 nm，在4000以内扫描一下。

三十七.有几种激光光源？

1.氩离子、半导体、氦氖；

2.可见光激光器应用最多的是氩离子激光器，可产生：10种波长的激光，其中最强的是488 nm（蓝光）和514 nm（绿光）激光器，现在最为常用，性能十分稳定的是514 nm激光器；另外，532 nm固体二极管泵浦激光器、632.8 nm（红光）、780 nm等可见光激光器；以及785 nm二极管、830 nm近红外激光器；掺钕的钇铝石榴石（YAG）激光器被用作傅里叶变换拉曼光谱的光源，其激光波长为1064 nm（红外）；染料激光器是目前较成熟、应用较为普遍的可调谐激光器，是共振拉曼研究时的理想光源。一般来说，拉曼光谱与激光的波长是无关的，选择不同波长的激光主要取决于研究的对象，如果研究生物蛋白质、细胞等，则需要波长较长的近红外光，避免了荧光对拉曼光谱的干扰，但，对于一些深色、黑色粉末样品，由于，近红外的热效应，而使热背景干扰拉曼光谱，这时，选择可见光区的激光比较合理。对于研究化学发光和荧光光谱，则选择紫外激光器。所以在研究颜料时，选配514 nm和785 nm（或830nm）两种波长的激光器就够用了，对于红、黄、白色颜料采用785 nm的激光器进行分析，对于蓝、绿色颜料则采用514 nm的激光器进行分析。

3.激光出现以前主要用低压水银灯作为光源，目前，已很少使用。为了激发喇曼光谱，对光源最主要的要求是应当具有相当好的单色性，即，线宽要窄，并能够在试样上给出高辐照度。气体激光器能满足这些要求，自准性能好，并且是平面偏振的。各种气体激光器可以提供许多条功率水平不同的分立波数的激发线。最常用的是氩离子激光，波长为514.5 nm和488.0 nm的谱线最强，单频输出功率为0.2～1 W左右。也可以用氦氖激光（632.8nm，约：50 mW）。

4.在光纤测量和光纤传感系统中使用的光源种类很多，按照光的相干性，可分为：非相干光源和相干光源。非相于光源包括白炽光源和发光二极管(LED)，相干光源包括：各种激光器。激光器按工作物质的不同，可分为气体激光器、液体激光器、固体激光器和半导体激光器等。半导体光源是光纤系统中最常用的也是最重要的光源。其主要优点是体积小、重量轻、可靠性高、使用寿命长，亮度足够、供电电源简单等。它与光纤的特点相容，因此，在光纤传感器和光纤通信中得到广泛应用。半导体光源又可分为发光二极管(LED)和半导体激光器(LD)。这两种器件结构明显不同，但是，却包含相同的物理机理。增益带宽高于任何其它媒质，主要由于光子发射是因两个能带间的电子运动所致。半导体激光器的典型增益曲线延宽到1012 Hz。

5.紫外的也有的比如，214 nm。

三十八.什么是CCD？

1.电荷偶合器件，Chargecoupleddevice；

2.固体检测器。目前，已被采用的固体检测器主要有：

CCD（Charge-CoupledDetector），电荷耦合检测器。二维检测器，每个CCD检测器包含2500个像素，将22个CCD检测器环形排列于罗兰园上，可同时分析120～800nm波长范围的谱线。

CID（Charge-InjectionDetector），电荷注入式检测器，二维阵列，28×28mm的芯片共有512×512（262，144）个检测单元，覆盖167～1050nm波长范围；

SCD（SubsectionCharge-CoupledDetector）分段式电荷耦合检测器，面阵检测器，面积：13×19mm，有6000个感光点，有5000条谱线可供选择；

CCD、CID等固体检测器，作为光电元件具有暗电流小、灵敏度高、信噪比较高的特点，具有很高的量子效率，接近理想器件的理论极限值。而且是超小型的、大规模集成的元件，可以制成线阵式和面阵式的检测器，能同时记录成千上万条谱线，并大大缩短了分光系统的焦距，使直读光谱仪的多元素同时测定功能大为提高，而仪器体积又可大为缩小，焦距可缩短到0.4m以下，正在成为PMT器件的换代产品。

3.CCD也有百万象素的。不是所有的ccd都应用于罗兰圆类仪器上。

典型仪器：VarianVistaMPX

CID也有大面积的，百万象素的，LeemanProdigy；

三十九.我要用激光拉曼做一种在-20度下就分解的物质,请问把样品保存在低温下测定可以吗?激光是否会使样品分解?

1.最好是把样品放在一个很小的容器里面，然后低温作实验，应该没有问题。

2.可以做的，激光可以穿玻璃，将样品放入透明的玻璃下面就可以了。

我看有的老师做固体样品时，防止激光打出的能量太高，将固体融化，污染镜头，或者，镜头不小心靠近样品，还在显微镜头上面套了一层透明塑料了

四十.我想做一个样品的标准曲线，溶剂是CF2H-CF2-CF2-CF2-CF2H，溶质是含有-O-的全氟化高分子，好像是直链的（UV-Visual无吸收峰）。想用拉曼光谱作定量分析，请问能不能做到？

1.能做，直接峰强定量；

2.做过照度和标准物校正后的拉曼仪可以直接使用峰强作为定量依据；

3.可以半定量。

四十一.用普通拉曼光谱仪对肿瘤细胞和正常细胞的光谱进行检测，