高效液相色谱仪维护保养技巧
高效液相色谱仪维护保养技巧
流动相的要求
液相色谱是指样品组分在柱填料和流动相之间进行的物质交换以达到分离的目的因此流动相要求具有以下特点：
纯度流动相在使用前必须使用高效液相色谱仪试剂和过滤器去除颗粒杂质和其他物质（用0.45um或更细的膜过滤）杂质在色谱柱上的积累将影响色谱柱的使用寿命。
溶解度样品的溶解度应适当。如果溶解度不好，样品会在柱头沉淀，不仅影响提纯分离，而且缩短柱的使用寿命。
低粘度（小于2cp）高粘度的溶剂会影响溶质的扩散传质，降低塔效，增加塔压降，延长分离时间。选择沸点低于100℃的流动相。
样品易于回收应选择挥发性溶剂。
当流动相pH值用于反相色谱分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，控制样品组分离解的技术，提高组分在固定相上的保留率和改善峰型被称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的K值就越大。当pH值远远低于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在，但对于弱碱性，相反是真实的分析弱酸样品时流动相通常加入少量弱酸一般为50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时流动相通常加入少量弱碱一般为50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
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