安捷伦1260液相色谱 操作流程
安捷伦1260液相色谱 工作站的详细操作方法
一、开机：
1、打开电脑；
2、打开液相色谱各个模块的电源；
3、双击桌面“LC1260(Online)”，进入联机界面；
二、排气：
1、手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）
2、右键单击“Pump”图标区域，选择“Method”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min，点击“确定”；
3、右键单击“Pump” 图标区域，点击“Control”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到
管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道
无气泡为止；
4、右键单击“Pump” 图标，点击“Method”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀；
5、右键单击“Pump”图标，点击“Method”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min；（不一定是1）；
6、同理右键单击“Column Comp”，“DAD”图标，点击“Method”选项，按照；
7、方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器；
三、编辑方法：
1、点击“Method”—— “Edit EntireMethod”开始编辑完整方法；
2、选中除“Data Analysis ”外的三项，进入下一选项卡，选择“Als”（自动进样），点击“OK”，进入下一选项；
3、选择“Method”菜单下“Method Information”选项，在“Method Comments”中加入方法的信息（如：
This is for test!），选择“OK”，进入下一选项；
4、泵参数设定：右键单击“Pump”图标，点击“Method…”选项，设置“Flow”：如1.0ml/min；“Stop
Time”：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配
比，选择“OK”，进入下一选项；
5、自动进样器参数设定：右键单击“Sampler”图标，点击“Method”选项，选择“Injection volume”，输
入进样体积，选择“OK”，进入下一选项；
6、柱温箱参数设定：右键单击“Column Comp”，点击“Method”选项，设置“Left”温度（可设置温度范
围：低于室温10℃-80℃），一般“Left”和“Right”温度一致，选择“Combined”绑定即可，“Stop
Time”选择“As Pump /Injector”，选择“OK”，进入下一选项；
7、UV检测器参数设定: 右击“DAD” ，点击“Method…”选项，下方的空白处输入所需的检测波长（可
根据需要选择多个波长，多可选8个波长）；“Stop Time”选择“As Pump /Injector”；“Spectrum”
——“Store”选项下，根据需要选择 “None”或“All（全波长扫描）”等选项，选择“OK”，进入下一选
项；
8、编辑方法完毕，从“Method”菜单中，选中“Save Method As”，输入一方法名，选择“OK”，保存方
法成功。
9、单针进样
10、从“Run Control”菜单中，选择“Sample Information”选项，输入“Operator Name”；在“Data File”中
选择“Path”和 “Prefix/Counter（文件命名）”设置“Prefix（一般设置为年月日）”和“Counter”；输
入“Location（样品位置）”和“Sample Name”，选择“OK”，进入下一选项；
11、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项，开始进样。
四、序列进样：
1、选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项，在“Confiqure Table”中选择需要选项，一般
为“Vial(样品瓶)”，“Sample Name(样品名称)”，“Method Name(方法名称)”，“Inj/Vial（进样次
数）”，“Sample Type（样品类型）”，“Datafile（文件名）”和“Inj Volume（进样体积）”；
2、点击“Inset”生成一行，设置上述参数，选中该行，点击“Copy”和“Paste”复制后修改相应参数，即
生成序列表，选择“OK”，进入下一选项；
3、点击“Sequence”菜单下“ Sequence Parameters”选项，选择序列数据的“Path”（序列会自动生成
以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议选择 “Prefix/Counter”保存；
在“Shutdown”选项下选中“Post-Sequence Command/Macro”，根据需要选择“PUMPALL OFF（序列
结束后关闭泵）”” “LAMPALL OFF（序列结束后关闭紫外灯）”” “STANDBY（序列结束后关闭紫外灯
和泵）”，选择“OK”，进入下一选项；（注：若“Path”中默认保存于C盘，则可点击“View”，选
择“Preferences”，根据需要添加相应的“SequenceTemplates”“Data”“Master Methods”保存路径）
4、从“Sequence”菜单，选中“Save Sequence Template As”，输入一序列名，选择“OK”，即可；
5、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Sequence”选项，开始序列进样。
（注：若中途停止运行，则选择“Run Control”中的“Stop Run/Inject/ Sequence”可保留图谱信息，若选
择Abort，则所有图谱信息都丢失）
五、数据分析（脱机状态使用）：
1、双击“LC1260（Offline）”图标进入的脱机画面
2、从“View”菜单中，点击“Data Analysis”进入数据分析画面
3、从“File”菜单选择“Load Signal”，选中所需的数据文件名，点击“OK”，则数据被调出。
4、谱图优化：从“Graphics”菜单中选择“Signal Options”。从“范围” 中选择“Full”或“Use Ranges” 选择
所需“Time Range”和“Response Range”，选择“OK”；从“Integration”中选择“Integration Events”，调
整“Area Reject”和“Height Reject”删除杂峰；点击“Set Integration”图标，可选择性消除不需要的积
分，若想消除该操作，则选择“Method Manual Events”上排左起第5个图标进行移除操作即可，点击
左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“Integration Events”。
（注：“Set Integration”图标为）
六、标准曲线绘制：
1、选择“Calibration”菜单下“New Calibration Table”，选择“Automatic Setup”中“Level（即标曲中对应
的点，个点即为1）”和“Defanlt Amount（标准品对应点的浓度）”，选择“OK”；
2、通过选择“Calibration”菜单下的“Add Level”选项依次添加各点参数，若为外标法，在“ISTD”项下
选“NO”，若为内标法则选“Yes”；“#”项下对应标准品和内标无的数字的应统一；若想更改标准曲线中
的对应点；
3、选择“Calibration”菜单下的“Recalibrate”项的“Mode”选项，选择“Average”则表示取当前点与标曲
中对应点的平均值替代标曲中原对应点，若选择“Replace”则表示将当前点取代标曲中对应点；
（注：修改“Defanlt Amount”中浓度单位的方法：选择“Calibration”项下“Calibration Setting”，修
改“Amount Units”，设置浓度单位；选择“Calibration”项下“Calibration Setting”，修改“Default
CalibrationCurve”，选择合适的曲线类型-Type，是否过原点-Origin和各点对于标准曲线的比重-
Weight，通常选Equal）
4、调出样品谱图，点击需要计算浓度的色谱峰，选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选
择“Report style”为“Detail”，点击“OK”后选择“打印预览”图标，在报告中即可体现计算结果。
七、 图谱重叠设置：
1、选择“File”菜单下“Overlay Signal”选项，选择任意需要重叠的图谱；
2、在“Signal”选项下，选择“3D Signal Overlay”图标（紧邻图谱上方左起第四个图标），在弹出
的“Adjust Signal OverlayOptions”对话框中调节交错时间和高度；若想移除重叠谱图，点击第六个图
标。
八、信噪比等参数计算：
1、选择“Report”菜单中的“System Suitability”项下的“Edit Noise Range”选项，设置时间范围（超过
1min）；
2、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选择“Report style”为“Perfomance+Noise”，点
击“OK”后，即可预览信噪比参数；
3、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”，选择“Report style”为“Extended Perfomance”，点
击“OK”后，即可预览对称性、拖尾因子等所有参数。
九、程序运行时检测出峰情况：
选择“File”菜单下的“Snapshot”选项即可。
十、打印报告：
1、从“Report”菜单中选择“Report Mode”，选择“Use Classic Reporting”；
2、从“Report”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将被打印。
十一、关机：
1、冲洗色谱柱和系统后，退出化学工作站及其它窗口，关闭计算机；
2、关闭Agilent 1260各模块电源开关。
