鉴别

(1)取本品与万古霉素标准品适量,分别加有关物质项下的流动相A溶解并稀释制成每1ml中含0.2mg的溶液,作为供试品溶液与标准品溶液,照有关物质项下的方法试验,供试品溶液主峰的保留时间应与标准品溶液主峰的保留时间一致。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集1180图)一致(3)本品的水溶液显氯化物鉴别(1)的反应(通则0301)。

检查

酸度取本品,加水制成每1ml中约含50mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为2.5~4.5。溶液的澄清度与颜色取本品5份,分别加水制成每1ml中约含0.1g的溶液,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,均不得更浓;如显色,与黄色或橙黄色6号标准比色液(通则0901第一法)比较,均不得更深。吸光度取本品适量,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.10g的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401),在450nm的波长处测定,吸光度不得过0.10有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。所有溶液必须在配制后4小时内使用。供试品溶液(a)取本品约1omg,精密称定,置5ml量瓶中,加流动相A溶解并稀释至刻度,摇匀。供试品溶液(b)精密量取供试品溶液(a)2ml,置50ml量瓶中,用流动相A稀释至刻度,摇匀。对照溶液精密量取供试品溶液(b)2.5ml,置100ml量瓶中,用流动相A稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液取万古霉素标准品适量,加水溶解并制成每1ml中含0.5mg的溶液,在65℃加热24小时,冷却色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以三乙胺缓冲液(取三乙胺4ml,加水至200m1,用磷酸调节pH值至3.2)-乙腈-四氢呋喃(92:7:1)为流动相A,以三乙胺缓冲液-乙腈-四氢呋喃(70:29:1)为流动相B,按下表进行线性梯度洗脱;流速为每分钟1.0ml;检测波长为280nm;进样体积20l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)100100系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,两个主峰间的分离度应大于5.0。对照溶液色谱图中,主峰峰高的信噪比应大于5.0。供试品溶液(b)色谱图中,万古霉素B峰的拖尾因子应小于1.6测定法精密量取供试品溶液(a)、供试品溶液(b)与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,按公式2计算。公式1:100Ab/(Ab+A:/25)公式2:100A;/25)/(Ab+A/25)式中Ab为供试品溶液(b)中万古霉素B的峰面积;A:为供试品溶液(a)中各杂质峰面积之和A1为供试品溶液(a)中各杂质峰面积限度单个杂质不得过4.0%,杂质总量不得过7.0%。供试品溶液(a)色谱图中小于对照溶液主峰面积的峰忽略不计。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第一法)测定。供试品溶液取本品约0.2g,精密称定,置顶空瓶中,精密加水5ml使溶解,密封,对照品溶液取无水乙醇适量,精密称定,用水定量稀释制成每1ml约含0.2mg的溶液,精密量取5ml,置顶空瓶中,密封。色谱条件以聚乙二醇(PEG20M)(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱;柱温为50℃;进样口温度为150℃;检测器温度为250℃;顶空瓶平衡温度为80℃,平衡时间为30分钟。测定法取供试品溶液与对照品溶液,分别顶空进样,记录色谱图。限度按外标法以峰面积计算,乙醇的残留量应符合规定。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法1)测定含水分不得过5.0%。炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.5%。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则821第二法),含重金属不得过百万分之三十万古霉素B照高效液相色谱法(通则0512)测定。所有溶液必须在配制后4小时内使用。供试品溶液(a)、供试品溶液(b)、对照溶液、系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下。测定法见有关物质项下。按公式1计算出供试品中万古霉素B的含量。限度应不少于93.0%。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1mg古霉素中含内毒素的量应小于0.25EU。(供注射用)