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液相平衡法测定植物组织水势(小液流法)

2019.11.19

一、原理

当植物组织与外液接触时,如果植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势),组织吸水、重量增大而使外液浓度变大;反之,则组织失水、重量减少而外液浓度变小;若两者相等,则水分交换动态平衡、组织重量及外液浓度保持不变。根据组织重量或外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度,然后根据公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。溶液渗透势的计算:

ψs=-ICRT                     (14-1)

式中ψs:溶液的渗透势,以mPA为单位;R:气体常数,为0.008314mPA/L/mol·K;T:绝对温度,即273+T ℃;C:溶液的质量摩尔浓度,以Mol/kg为单位;i:溶液的等渗系数,CACl2可用2.6。

二、仪器与用具

小液流法测定水势装置若干套。每套包括10ml试管16支,分成甲、乙两组,其中甲组附有软木塞,乙组附有中间插橡皮头弯嘴毛细管的软木塞;特制试管架1个;打孔器1个;镊子1把,解剖针1支;5Ml移液管8支;05Ml移液管8支;特制木箱1个(可将上述用具装箱带到田间测定)。

三、试剂

甲烯蓝粉末,装于青霉素小瓶中;

CaCl2溶液,包括质量摩尔浓度为0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40(mol/kg)的8种浓度(也可用蔗糖溶液)。

四、方法步骤

1、取干燥洁净的试管16支,分成甲、乙两组,分别插在试管架相应的位置。甲组试管中分别加质量摩尔浓度为0.05~0.40mol/kg的8种浓度的CaCl2溶液之一,各4ml左右,乙组试管用同样的方法加入8种浓度的CaCl2溶液各0.5ml,甲、乙两组试管分别塞上相应的软木塞备用。

2、选取均匀一致的植物叶片8~10片,叠在一起,用打孔器打取叶圆片8~10片,放入乙组试管内的一种浓度中,使叶片浸入溶液,塞紧软木塞,平衡20min以上。期间多次摇动试管,以加速水分平衡。

3、到预定时间后,在乙组每一试管中用解剖针放入微量甲烯蓝粉末,摇匀,溶液变蓝。

4、用毛细管在乙组试管中吸取有色溶液少许,插入装有同样浓度溶液的甲组试管中,毛细管尖端放在溶液中部,轻轻挤出有色溶液1小滴,小心取出毛细管(勿搅动有色液滴)。观察有色小液滴的升降情况。

若液滴下降,表示溶液浓度变大,植物组织吸水,组织水势低于溶液渗透势;若液滴上升,表示乙组相应试管中溶液浓度变小,植物组织失水,组织水势高于溶液渗透势;若液滴不动,则表示植物组织既不失水也不吸水,组织水势与溶液渗透势相等,该溶液的渗透势即为植物组织水势。若前一浓度中液滴下降,后一浓度中液滴上升,则用二者浓度的平均值。

分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式(14-1)计算出组织的水势。

5、测定并记录不同处理植物组织的水势,分析各自的水分状况。

五、注意事项

1、所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口。

2、取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速,以免失水。

3、带结晶水的甲烯蓝不易溶于CaCl2溶液,可在100℃烘干成无水甲烯蓝粉末使用。


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