CRISPR分子诊断技术（四）
19 由于其高灵敏度和特异性，CRISPR诊断技术或CRISPR-Dx可以有很多用途：病毒检测和病毒亚型区分，病菌识别和耐药性基因确认，即时检测（POCT）, 患者基因分型，以及癌症突变分析和液体活检。这篇论文也初步展示了CRISPR-Dx在这些方面的应用前景。
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20 比如，利用SHERLOCK，张锋团队从患者的血清（S）或尿液（U）里检测到浓度低至每微升含单一拷贝的塞卡病毒（ZIKV）。美中不足的是，在用SHERLOCK检测之前，需要从患者的体液样品中提纯病毒RNA，这影响了该方法的便捷性。
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SHERLOCK也可被用在癌症液体活检中，从（模拟）患者的游离DNA (cfDNA) 样品中检验出只占0.1%的基因突变（BRAF
V600E）。也就是说，SHERLOCK的特异性可达到单碱基分辨度。要想达到如此高的特异性，crRNA的设计很关键。
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22 2017年5月，在张锋团队的Science论文发表不到一个月后，Doudna团队又在Molecular Cell上发表了一篇论文。文中发现所有的Cas13a可以被分为两个亚族。和不同亚族Cas13a配套的crRNA具有不同的辅助序列，激活后Cas13a-crRNA对同一报告RNA的非特异剪切活性也有差别。作为两个亚族的代表，LbaCas13a更易剪切5个A串成的报告RNA，而LbuCas13a偏爱剪切5个U串成的报告RNA。两个Cas13a亚族的区别，使它们可以被用来构建多重高通量诊断分析，即在一次测试中可以同时检验多个靶分子。
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23 2018年2月到4月是CRISPR-Dx技术的爆发期。Doudna实验室和张锋实验室各有一篇论文于2月15日被Science在线发表。在4月27日的纸版的Science中，这两篇论文连同张锋团队的另一篇论文 “back-to-back-to-back”一起发表。在Doudna的Science论文中，他们找到了Cas13a在DNA分子识别、剪切和降解上的相应蛋白——Cas12a。Cas12a不是一个新蛋白，而是张锋团队于2015年9月发现并命名的Cpf1（图8）。
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Cas12a-crRNA识别单链或双链DNA。一旦被激活后，Cas12a非特异性地剪切、降解单链DNA。他们借鉴了SHERLOCK技术，也引进了RPA步骤。RPA
+
Cas12a成为新的核酸分子检验技术，被命名为DETECTR，与英文的“探测器”谐音。与SHERLOCK相比，DETECTR省掉了从扩增后的DNA产物转录到RNA这一步。
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