真菌感染的实验室检查的检查过程

　　(1)、直接镜检法和培养法

　　直接镜检法和培养检查法是形态学检查的基本方法，直接镜检是真菌学检查最经典的方法,具有快速、简便的特点。但阳性率较低，1次取材直接涂片法的漏诊率高达45%，而3次取材直接镜检的累积阳性率可达99%，因此，阴性结果不能排除诊断，与培养检查结合才能确诊。培养检查法可进—步提高病原体检出的阳性率，验证直接镜检的结果，同时确定致病菌的种类。某些真菌感染的组织寄生形态具有特征性，对于诊断具有重要意义，如念珠菌感染在组织中可以同时发现酵母细胞和假菌丝：隐球菌感染可见带有荚膜的酵母细胞：曲霉菌感染可见五色、45°分支分隔的菌丝：毛霉菌感染可见粗大无分隔呈直角分支的菌丝；组织细胞内的酵母细胞常提示组织胞浆菌或马尔尼菲青霉菌感染：棕色菌丝和/或孢子常提示暗色真菌感染。通过碘酸-雪文氏染色PAS和银染等特殊染色可以更清楚地显示真菌细胞。

　　(2)、组织病理学检查

　　组织病理学检查对于确定致病菌在组织内寄生并了解宿主的反应十分重要，而且一旦在组织切片中发现真菌菌丝和/或孢子，即为诊断的有力证据。其结果与直接镜检和培养相结合对诊断的意义更大。除常用的真菌病原体染色方法外，免疫组化特异抗体染色可对临床常见条件致病菌做出特异性诊断。马蕾等采用微波Envision免疫组化二步法对34例深部真菌病患者的标本用福尔马林固定，石蜡包埋切片进行PAS染色，微波Envision免疫组织化学标记。结果示免疫组织化学染色16例为可疑曲霉菌感染中14例阳性；11例可疑隐球菌感染全部阳性；7例念珠菌感染6例阳性。菌体染色清晰无背景。因此，微波Envision免疫组化二步法应用于深部真菌感染检测具有高敏感、低背景、快速简便的特点，在真菌病的临床病理诊断中具有很好的应用价值。有学者指出免疫组化方法较PAS方法可特异地对白念珠菌、新型隐球菌和曲霉菌感染作出诊断。