高内涵细胞分析仪的细胞生物学应用——干细胞相关研究

高通量细胞生物学是指将自动化仪器设备和细胞生物学技术整合，来回答传统方法不能解决的问题。它需要用到先进的成像技术、化学试剂和生物学方法，快速、多通路地获得细胞表型、功能和相互作用的信息。它的核心思想是尽可能多地获得数据——无论是来源于大量样本，还是采用“组学”的研究方式，同时不降低数据的质量。

英国TTP LabTech公司推出的Acumen eX3高内涵细胞分析平台配备有405nm、488nm和633nm三种不同波长的固态激光发生器，兼容众多的荧光染料。Acumen eX3具有全孔高速成像和多重荧光分析的能力，兼有CCD成像系统和流式细胞仪的优点，能在10min内完成对微孔板（包括96、384、1536孔板）的整板扫描。目前，该平台已经成功地应用于各种细胞水平的研究，包括对人类基因组RNAi文库的筛选研究1－3，癌症相关的研究2（包括细胞周期、细胞增殖、克隆形成、细胞毒性、凋亡、细胞粘附、血管生成、蛋白激酶等），以及干细胞分化的研究3。特别值得一提的是，AcumeneX3的高质量成像优势在组织切片、动物模型（如线虫，果蝇和斑马鱼）等系统生物学研究领域也备受推崇。在过去短短的几年里，Acumen eX3已经成为科研和制药领域最为推崇的高通量细胞生物学的研究利器之一。

干细胞因其具备分化成为其它细胞类型的能力，使其在机体修复过程中担负着重要作用。由于干细胞这种能被用于治疗人类疾病的潜力，使得关于干细胞的研究在当今医学研究领域被认为是最重要、最具潜力的方向之一。

由于干细胞的增殖和分化是小概率事件，捕捉这样的事件需要扩大筛选量，并尽可能对所有细胞进行成像和分析。Acumen eX3正是具有这种高通量的全孔成像能力，特别适合检测化合物刺激和RNAi诱导下干细胞的增殖和分化。通过各种分子标记和染料，Acumen eX3能精确的统计出分化的干细胞占总细胞数的比率。

图1 用Brdu－Alexa 488抗体和PI染色确定干细胞的增殖

神经干细胞是存在于脑组织中的一种干细胞，可以分化成神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等。其自我增殖较快有着较稳定的细胞库来源，除了具有多向分化潜能性外，神经干细胞免疫原性较低不表达成熟的细胞抗原，有着很好的组织相融性能够在宿主体内长期存活，我们的用户也成功的将Acumen eX3用于检测神经干细胞分化的实验。

图2.mNPC细胞诱导分化后进行DAPI染色和Tuj1抗体标记并应用Acumen eX3的405nm激光和488nm激光进行扫描成像。

参考文献

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