分光光度（紫外吸收）法检测 DNA 及 RNA 的纯度及浓度
1、预热
预热紫外分光光度计10～20min。
2、狭缝石英比色杯
取两只 1mL 的狭缝石英比色杯，一只装入 1mL 蒸馏水，作为空白溶液，用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。
3、DNA纯度及浓度测定
（1）取5μL DNA 待测样品或4μL RNA 样品加入另一只比色杯中，加蒸馏水至1000μL，用无菌石蜡膜堵住杯口，倒转混匀。
（2）将两只比色杯置分光光度计中，调入射光波长，分别用空白溶液调整零点（T 为100，OD 为0），测定持测样品液在260nm，280nm，230nm 的 OD 值。
（3）计算浓度：对于双链 DNA 1.0 OD260＝50μg/mL，DNA 样品浓度（μg/μL）为OD260×N（样品稀释倍数）×50/1000。按①方式稀释被测 DNA 样品的浓度为其 OD260值的10倍，即 OD260＝0.1时，其浓度为1μg/L。对于单链 RNA 1.0 0D260＝40μg/mL。RNA 样品浓度（μg/μL）为 OD260×N（样品稀释倍数）×40/1000。按①方式稀释被测RNA 样品的浓度为其 OD260 值的10倍，即 OD260=0.1时，其浓度为1μg/μL。
（4）测定纯度：纯的 DNA 溶液其 OD260/OD280 应为1.8，OD260/OD230应大于2.0。OD260/OD280大于1.9时，表明有 RNA 污染，小于1.6时表明有蛋白质或酚污染。OD260/OD280小于2.0时，表明溶液中有残存的盐和小分子杂质，如核苷酸、氨基酸、酚等。纯的 RNA 溶液其 OD260/OD280 的比值应介于1.7至2.0，OD260/OD230 的比值应大于2.0。RNA 样品 A260/A280 的比值太小，说明有蛋白或苯酚污染；比值大于2.0，则可能被异硫氰酸胍等污染；OD260/OD230 的比值小于2.0时表明有小分子及盐存在。
