饲料中总磷量的测定

2019.4.29

饲料中总磷量的测定

1 测定范围

磷含量0—20ug/ml

2 测定原理

将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，钒钼酸铵处理，生成黄色的(NH4)3·PO4 NH4VO3·16M O O3(磷－矾－钼酸复合体)，在波长420nm下进行比色测定。3仪器及设备

粉碎机或研钵

分析筛：40目，孔径0.45mm

分析天平，感量0.0001g

分光光度计，有10mm比色池，可在420nm下进行比色测定

高温炉：可控炉温度（550度左右）

坩埚：瓷质

容量瓶：50，100，1000ml

刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10ml

凯氏烧瓶

电炉：1000W

4 试剂及配制

4.1 盐酸（化学纯）溶液：1：1水溶液（V：V）

4.2 浓硝酸化学纯

4.3 钒钼酸铵显色试剂：称取偏钒酸铵（分析纯）1.25g，加硝酸250ml，另取钼酸铵（分析纯）25g，加蒸馏水400ml溶解，在冷却条件下将此溶液倒入上溶液，且加蒸馏水调至1000ml，避光保存。如生成沉淀则不能使用。

4.4 磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105度干燥1小时，在干燥器中冷却后称0.2195g，溶解于蒸馏水中，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，即成50ug/ml的磷酸标准溶液。

4.5试样的选取和制备

取有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目，装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质。

4.6测定步骤

4.6.1 试样的分解

4.6.1.1 干法：称取试样2—5g于坩埚中（准确至0.0002g），在电炉上低温炭化至无烟为止，再将其放放高温炉于550度左右下灼烧3小时（或测灰分后继续进行），取出冷却在坩埚中加入1：1盐酸溶液10ml和浓硝酸数滴，小心煮沸约10分钟，将此溶液转入100ml容量瓶

中，并用热蒸馏水洗涤坩埚及漏斗中滤纸，冷却至室温后，定容，摇匀，为试样分解液。

4.6.1.2 湿法：称取试样2—5g于凯氏烧瓶中（准确至0.0002g）加入硝酸（化学纯）30ml，小心加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入70％—72％高氯酸（分析纯）10ml，继续加热煮沸至溶液无色，不行蒸干（危险），冷却后加蒸馏水50ml，并煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，为试样分解液。

4.6.1.3 标准曲线的绘制

准确移取磷标准溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色制10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟以上，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在420nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

4.3.1.3 试样的测定

准确移取试样分解液1—10ml（含磷50－750ug）于50ml容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，按（4.6.1.3）的方法显色和比色测定，以空白为参比，测得试样分解液的吸光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量。

4.7 测定结果计算

4.7.1 计算公式

样品中总磷质量分数按下式计算

W(p)=a*(V/V1)/m

式中：m为试样质量；V为试样分解液总体积；V1比色测定时所移取试样分解液体积；a为由标准曲线查得试样分解液含磷量。

所得结果应精确到两位小数

4.7.2 重复性。每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。

含磷理在0.5％以下（含0.5％）以允许相对偏差3％；

含磷量在0.5％以下，允许相对偏差10％

4.8 注意事项