对于血清实际应用中常见问题分享交流
1.血清冻结后发现有絮状沉淀物呈现,该如何处置?
血清中沉淀物的呈现有许多缘由,但最普遍的缘由是由于血清中脂蛋白的变性形成的;而血纤维蛋白(构成凝血的蛋白之一)在血清冻结后,也会存在于血清中,亦是形成血清沉淀物的主要缘由之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清自身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,能够将血清分装至无菌离心管中,以400g略微离心,上清液即可接着参加培育基内一同过滤。我们不倡议您以过滤的办法去除这些絮状沉淀物,由于它可能会阻塞您的过滤膜。
2.何谓热灭活?有必要做热灭活吗?
普通以56℃,30分钟来处置已冻结的血清,由于此加热步骤,能够使补体去活性,而补体所参与的反响有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,加强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
实验显现,经过正确处置的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需求的。经过处置的血清对细胞生长只要微小的促进,或完整没有任何作用,以至通常由于高温处置影响了血清的质量,而形成细胞生长速率的降低。
而经过热处置的血清,沉淀物的构成会显著的增加,这些沉淀物在倒置显微镜下察看,像是“小黑点”,常常会让研讨者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增加,使研讨者以为是微生物的团结扩增。
因而我们倡议您,若非必需,您能够不需求做热灭活这一步。如此以来,不但俭省您珍贵的时间,更确保您血清的质量!
3.如何防止沉淀物的呈现?
我们倡议您在运用血清的时分,留意正确的血清冻结步骤,并尽量防止灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中
4.保管血清最好的方法?
我们倡议血清应保管在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,倡议您无菌分装血清至恰当的灭菌
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