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AD认知记忆实验中的常用方法——水迷宫(一)

2021.3.01

水迷宫(Water Maze)是目前阿尔茨海默病(Alzheimer Disease, AD)研究中使用得最多的行为学实验方法,主要用于检测啮齿类动物的空间记忆能力。该方法是由理查德-莫里斯(Richard Morris)于1981年发明,并在三年后对其实验流程进行了进一步的完善,为了表示对发明者的纪念和尊重,人们把这种实验叫做“莫里斯水迷宫(Morris Water Maze,WMW)”。

 

从80年代初被发明之后,水迷宫逐渐成为AD认知记忆实验中的“主力”。当我们同时以阿尔茨海默症和行为学实验名称进行搜索时,水迷宫的检索所得项目要远多于其他任何行为学实验(图1A)。而且水迷宫对AD行为学研究的统治地位是与日俱增的,在1995年之前,水迷宫实验占列入统计的7种行为学文献总数的44%(图1B),但是到了2020年,这一比例已经增长到了54%(图1C)。由此可见AD研究中水迷宫所处的“统治地位”。

 

图1. 水迷宫是AD研究中最重要的行为学实验

 

但是和许多动物行为学实验一样,不同的论文中该实验无论是在器材规格,实验流程以及数据统计方面都有很大的差异,往往令人疑惑不解,搞不清楚水迷宫实验到底有没有统一的标准,哪些参数是可以更改的,哪些参数是需要慎重考虑的。为了解答这些疑惑,我们计划从设备、主要流程和统计分析三个篇章来对水迷宫进行解析,希望能让大家对水迷宫实验有一个大致的了解,对影响水迷宫实验的各种因素做到心中有数。需要注意的是,为了叙述方便,这里我们所采用的流程和实验器材规格都是针对小鼠的,虽然大鼠实验中参数会有一定的变化,但是原理是一样的。今天我们从设备即器材的选择开始讲。

 

水池(Tank)

水迷宫实验的主体是一个圆形的水池,水池的内径一般为120-130cm之间。虽然也有研究采用的是直径100cm或者180cm规格的水池,但水池过大会造成小鼠需要探索的面积增大,学习时间过长,并且小鼠的娇小体型不利于热量的保存,在水中焦躁地游泳进一步加剧了热量的消耗,过长的游泳时间不利于小鼠身心健康,甚至危及生命;另一方面,过大的水池也会造成操作困难,尤其是在引导水池中未完成任务的小鼠走上平台的过程中,小鼠如果位于水池中间,就是考验实验人员手臂长度的时候了。反过来,水池过小会导致实验难度过低,有可能不能对神经系统损伤的小鼠和正常小鼠进行有效区分,可以理解为考题太容易,学习成绩差的学生和优等生都能做出来。

 

水池一般为50-60cm高,其中水深30cm,留出20-30cm的边缘可以用来放置提示方位用的标志物(Cue)。边缘不宜过低,因为低于10cm的话小鼠在游泳过程中可能会跳出水池,另一方面也没有足够的空间贴标志物。水池一般会由支架支撑起来,高度上方便实验人员进行操作。

 

图2. 小鼠水迷宫尺寸

 


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