放射免疫分析的基本试剂是什么

1、标准品

标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量来表示被测物质的量,故标准品与被测物质的化学结构应当一致并具有相同的免疫活性。标准品作为定量的基准,应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液,用于制作标准曲线。

2、标记物

标记抗原应具备:①放射性比活性高,以保证方法的灵敏度;②免疫活性好;③所用的核素的半衰期尽可能长,标记一次可较长时间使用,这对来之不易的抗原尤其重要;④标记简便、易防护。要准确测量B与F的放射性,必须有足够的放射性强度。所选用的标记抗原的量,在使用125I时达5000～15000cpm。

3、抗体

应选择特异性高、亲和力强及滴度好的抗体,用于放射免疫测定。根据稀释曲线,选择适当的稀释度,一般以结合率为50%作为抗血清的稀释度。

4、 B与F分离剂

以2%加膜活性炭溶液为例,活性炭2g,右旋糖酐T 200.2g,加0.1mol/L PB 至100mL 电磁搅拌1h,然后置于冰箱待用。

5、缓冲液

放射免疫分析技术所用的缓冲液有多种,要通过实验选用抗体和抗原结合最高的缓冲液。目前最常用的缓冲液有下列几种:①磷酸盐缓冲液;②乙酸盐缓冲液;③巴比妥缓冲液;④Tris-HCl 缓冲液;⑤硼酸缓冲液。其中以磷酸盐缓冲液应用最多。