1. 抗体琼脂板的制备:同单向扩散法,但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05 M 的巴比妥缓冲液。 2. 打孔见下图
图1 火箭电泳抗原孔位置图 3. 将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原(人血清)分别加入各孔中,每孔10或20微升,要求加量准确而不外溢。 4. 把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳,电压4~6伏/厘米,电泳时间1~5小时,直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线,关闭电源。
5. 取下琼脂板,以抗原孔中心为起点,量出各火箭状沉淀线的高度。同单向琼脂扩散法绘制标准曲线,查出待检血清中Ig含量。 展开 |