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ELISA-IgM检测和被动凝集法检测肺炎支原体抗体的比较

2019.12.07

一、肺炎支原体感染的特点

肺炎支原体(MP)是一种常见的非典型肺炎的病原体,经飞沫和直接接触传播,临床多表现为呼吸道感染综合征,起病可急可缓,以发热和咳嗽为主要表现。中高度发热多见,也可低热或无热。MP对大环内酯类抗生素敏感, 但对常规治疗肺炎的药物耐受。早诊断、早治疗有利于避免滥用抗生素, 缩短病程。

二、肺炎支原体的实验室诊断

肺炎支原体的诊断包含两方面:临床诊断(经验性)和结合了实验室病原学检测的确定诊断。只根据临床症状很难鉴别有支原体,病毒或细菌等引起的儿童呼吸道感染。MP培养比较挑剔,分离鉴定需要2周以上。随着技术发展,血清检测从冷凝集法进展到被动凝集法,再逐步过渡到MP特异IgM、IgG抗体检测。肺炎支原体核酸检测方法有RT-PCR技术,环介导的等温扩增(LAMP)技术等。目前日常实验室检测,血清学仍是主导方法。急性期和恢复期,MP-IgM或IgG抗体水平(被动凝集法的滴度值)呈4倍或4倍以上增高或减低时,都可用于感染确诊。

三、抗体分型检测和凝集法的比较

1、被动凝集法

被动凝集法是间接血凝试验的改良,以明胶颗粒作为载体。其原理是将吸附了MP抗原的明胶颗粒与待检血清中相应抗体作用, 出现肉眼可见的凝集现象。被动凝集法操作简便、无需特殊的实验设备,已广泛应用于临床。早期国内有时直接将其称为MP-IgM试验,但实际上它测定的是肺炎支原体特异性抗体的总和,包含IgA、IgM、IgG,而非直接检测MP-IgM,因而以其阳性结果来代替MP-IgM,势必阳性率偏高。

2、MP-IgM提示近期感染

MP-IgM在发病7天左右出现,3~4周达到峰值,随后开始下降。由于MP感染潜伏期为1~3周,因此当患者就诊时,大部分均已出现MP-IgM。单次测定MP-IgM,结果阳性对诊断MP的近期感染很有价值。ELISA可以做到真正的分型检测MP-IgM,。ELISA具有高敏感性、特异性强的特点, 还有重复性好、操作简便等, 是免疫学检验中最为常用的方法之一。

3、MP-IgM单项检测结果更灵敏

ELISA法仅检测MP-IgM抗体,可在抗体水平尚未达到峰值时敏锐捕捉IgM抗体水平变化,灵敏度更高。而被动凝集法检测的是混合抗体,当初次感染早期,或者再次感染时IgM水平不高的情况下,被动凝集法不能敏感地反应IgM抗体水平的变化。

4、 MP-IgM有效避免“凝集法假阳性”

肺炎支原体感染不能终身免疫,会反复感染,因此很多患者血清中存在既往感染产生的MP-IgG抗体。被动凝集法检测的是IgM和IgG的混合抗体,因而凝集法阳性结果不能完全作为急性感染的指证。如以说明书中的≥1:40为判断标准,会引入不少假阳性结果。为了减少IgG抗体的本底影响,一般指南指出凝集法的结果≥1:160才可作为近期感染的参考。但由此凝集法的敏感性也会相应下降。ELISA法仅检测MP-IgM抗体,排除了IgG的干扰,结果更特异。

 综上所述,凝集法操作简便,结果易读,技术要求难度低,较适用于基层医疗机构开展。而ELISA-IgM检测灵敏度高,特异性好,对肺炎支原体早期感染有更好的提示作用。




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