动态光散射技术入门（二）
DLS法的局限性
DLS方法的大多数局限性可以或已经通过对实验操作过程进行改进，或对DLS技术进行改进来加以克服；但在区分仪器类型，尤其是对于那些要求异常苛刻的应用而言，它的局限性仍然值得我们加以关注。一般来说，DLS使用过程中遇到的大多数问题是出于以下原因：
· 存在较大的颗粒
超出仪器最高量程范围的颗粒应该事先被过滤掉。或者，如果大颗粒的存在量极少也可以通过软件进行处理。
· 沉淀
这种现象在较为致密的颗粒中尤其比较容易出现。提高分散液密度是比较有效的抑制方法（比如在系统中加入蔗糖），但这种方法仅适用于密度不高于1.05g/ml的样品体系。
· 分辨率较低
DLS不属于高分辨率的技术。当样品的粒度分布排列十分密集，且存在三种以上的粒度分布差异时，DLS 将无法对多重分散样品进行精确表征。在这种情况下，建议最好在测量之前对样品进行分离；而在测量方法上，则需要将DLS与制备技术如凝胶渗透法或尺寸排除色谱法（GPC / SEC）和（或）流场分离技术（FFF）联合使用。
· 多重光散射
多重散射是指从一个颗粒发出的散射光在到达探测器之前又会被其它粒子再次散射，在较致密的样品中，这种现象会使粒径计算的精确度受到影响。背散射检测器以大于90°的角度进行测量，大大抑制了这一现象，从而扩大了该技术的测量范围。
· 分散剂的选择
虽然大多数分散剂都适用于DLS，但如果分散剂粘度大于100mPa.s，往往会影响测量的可靠性，另外分散剂对光的吸收也会对检测产生干扰。比如有色样品的散射光强度可能会有所降低。一种可行的解决方案是根据系统的灵敏度，采用不同的激光波长进行分析或对样品进行稀释。样品中的荧光也会对信噪比造成影响，但可以通过使用窄带滤波器来解决，以排除荧光杂散光的影响。
界定DLS检测仪的特性
上述的讨论是在对DLS仪器的界定特征进行检验的背景下展开的。对于任何分析技术，灵敏度都是最基本的要素，对于DLS系统，这方面的性能是由光学硬件和相应的设置来确定的。稀释度较高时，具有优越光学设置的系统能对较小的颗粒进行可靠测量，但对于在这些功能方面要求不高的应用而言，替代方案可能会更为经济。光学设置的主要元件包括：
· 激光源
具有低噪特性的稳定激光源最为合适，如某些氦氖气体激光器。也可以使用某些特定的固态激光器，但价格要贵得多；低成本的固态激光器使测量结果的精度和可重现性受到极大影响。
· 光学设置
光学设置的核心是进行测量的散射角。测量角固定于90o时，可使系统简便而经济高效，为许多应用（见图1）提供合适的灵敏度级别。这类系统已得到广泛使用。
当实验需要灵敏度更高，或样品浓度更高时，最好选择较大的测量角度。例如马尔文仪器公司ZetasizerNano系列激光粒度仪，采用非侵入式背散射检测器(NIBS)，将测量角度调到175o（参见图1），扩大了颗粒粒度与浓度的测量范围。由于入射光无需通过整个样品，因此显著减少了多重散射引起的测量不准确性，同样也排除了大灰尘颗粒的影响。
在上述两种类型的设置中采用了光纤光学收集组件，其提供的信噪比优于传统的相应部件，从而大大提高了数据质量。
