聚丙烯酰胺凝胶电泳仪凝胶的性能指标
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术，聚丙烯酰胺凝胶的性能指标有凝胶总浓度和交联度等。
一、凝胶总浓度（T）：
凝胶总浓度表示凝胶溶液中单体和交联剂的总百分含量。
T = [（a + b）/m]×100%
式中：a为单体Acr的质量（g），b为交联剂Bis的质量（g），m为溶液的体积（mL）。
凝胶总浓度主要影响凝胶筛孔大小。凝胶平均孔径随着凝胶总浓度的增大而减小。
实验表明，凝胶筛孔的平均直径和凝胶总浓度的平方根成反比。即：
D＝kd/（T1/2）
式中：D为凝胶筛孔的平均直径，d为多聚体分子直径，k为常数。
凝胶总浓度可在3%～30%之间变化。凝胶总浓度过高，凝胶硬而脆，易破碎。凝胶总浓度过低，凝胶稀软，不易操作。
二、交联度（C）：
交联度表示凝胶溶液中交联剂占单体和交联剂总量的百分含量。
C = [b/（a + b）]×100%
交联度决定凝胶筛孔的大直径。交联度过高，凝胶不透明，缺乏弹性。交联度过低，呈糊状。要获得透明而有合适机械强度的凝胶，单体用量高时，交联剂量应减少；单体用量低时，交联剂量应增大。
a和b的比例很重要，决定凝胶的物理性质。
当a/b＜10时，凝胶脆且硬，不透明，呈乳白色。
当a/b≈30且T = 3%时，凝胶富有弹性，完全透明。
当a/b≥100时，即使5%的凝胶也呈糊状。
当a＜2%和b＜0.5%时，凝胶不能聚合。
三、良好凝胶的经验公式：
在100mL溶液中，Acr（g）×Bis（g）≈1.3
常用凝胶的组成是T＝7%～7.5%，C＝2%～3%。
标准凝胶的组成是T＝7.2%，C＝2.6%，可较好分离蛋白质。
当分析未知样品时，常用标准凝胶或4%～10%的梯度凝胶试测，然后确定合适的凝胶总浓度。
推荐
