通过加入糖进行蜂蜜掺假的LC-IRMS 测定
化学分析：
新近发展的LC-IRMS ( 液相色谱- 同位素质谱联用)分析方法是正式的AOAC (
分析家协会正式分析方法) 中编号为NO.998.12( 蜂蜜中C-4
植物糖含量的测定，1999)分析方法的进一步发展，经过几年的研究，APPLICA 公司成功地完善了AOAC
方法中峰蜜中组份的常规检测，并将其制定为国际认证标准方法(ISO 17025)。尽管如此，某些种类的添加糖( 如甜菜中C-3 糖的测定)
不能被检测，因此分析方法的完善显得迫在眉睫，在用户需求的推动下，APPLICA 公司于2005 年开始这项研究项目，并最终发展了LC-IRMS
这一分析技术。这一技术弥补了AOAC 方法中蜂蜜各组份如果糖、葡萄糖、二糖、三糖等13C/12C 同位素比值(d13C) 测定，LC-IRMS
这一革新在线联用新分析方法可检测AOAC 方法无法检测的各种糖。
分析结果的解释是建立在AOAC 分析方法及各种糖组份同位素组成的基础之上，各种糖组份同位素的含量测定与AOAC 方法一致，表1 列出的是纯蜂蜜中糖组份同位素含量及其变化范围。
表1：纯蜂蜜中糖组份 d 13 C( LC-IRMS)测定值（测定值是通过VPDB进行校正的）
| 序号 | 测定项目 | 测定值（纯蜂蜜） | 参考文献 |
| 1 | 蛋白质中d 13 C值(P) | -27.5～ -25.5‰ | White & Doner a,b |
| 2 | 蜂蜜中d 13 C值(H) | -27.5～ -25.5‰ | White & Doner a,b |
| 3 | 蛋白质与峰蜜中d 13 C Delta差值(P-H) | 小于-1‰ | White & Doner a,b |
| 4 | C-4糖含量 （计算） | 小于7% （文献值） | White & Winters c AOAC 998.12 d |
| 5 | 果糖中d 13 C值 -与葡萄糖中d 13 C差值 -与二糖中d 13 C差值 -与三糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -27.5～ -25.5‰ -1～ +1‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ | 摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al. e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA |
| 6 | 葡萄糖中d 13 C值 -与果糖中d 13 C差值 -与二糖中d 13 C差值 -与三糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -27.5～ -25.5‰ -1～ +1‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ | 摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA |
| 7 | 二糖中d 13 C值 -与果糖中d 13 C差值 -与葡萄糖中d 13 C差值 -与三糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -27.5～ -25.5‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ | 摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA |
| 8 | 三糖中d 13 C值 -与果糖中d 13 C差值 -与葡萄糖中d 13 C差值 -与二糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -27.5～ -25.5‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ -2～ +2‰ | 摘自no.2 APPLICA APPLICA APPLICA APPLICA |
近期出版的刊物中，Cabanero et al.d 用同样方法测定了蜂蜜中的掺假糖，其测定条件比APPLICA 公司更为苛刻。表1 中测定值的不确定度为±0.3‰。
除d13C
同位素比值外，果糖/ 葡萄糖的比值，二糖及三糖的相对含量也可通过LC-IRMS 进行测定( 见表2，第9~12
项)。当分析花蜜中的组份时，这些组份的含量显得非常有趣，它给出了潜在可能的掺假信息，文献f,e 给出了果糖/
葡萄糖比值的参考值，二糖与三糖的含量与纯蜂蜜中测定值相吻合，表2
给出了纯金合欢及花蜜中各组份的平均值及变化范围，由表可以看出，这些测定都在表1中所列数据范围之内。
表 2 ：纯金合欢及花蜜中糖组份 d 13 C( LC-IRMS) 测定值（测定值是通过 VPDB 进行校正的）
| 序号 | 测定项目 | 纯金合欢 (n=60) | 纯花粉及蜜汁 (n=196) | ||
| 平均值 | 范围 (最小值/最大值) | 平均值 | 范围 (最小值/最大值) | ||
| 1 | 蛋白质中d 13 C值 | -24.7‰ | -25.5/-23.7‰ | -25.4‰ | -26.7/-22.7‰ |
| 2 | 蜂蜜中d 13 C值 | -25.1‰ | -25.6/-24.1‰ | -25.7‰ | -27.3/23.0‰ |
| 3 | 蛋白质与蜂蜜中Delta d 13 C 差值 | 0.4% | -0.3/0.9‰ | 0.3‰ | -0.9/1.5‰ |
| 4 | C-4糖含量 | 0.1‰ | 0/1.9‰ | 0.3‰ | 0/5.7‰ |
| 5 | 果糖中d 13 C值 -与葡萄糖中d 13 C差值 -与二糖中d 13 C差值 -与三糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -25.1‰ -0.1‰ 0.2‰ -1.0‰ -0.4‰ | -25.6/-23.9‰ -0.8/1.2‰ -1.0/1.5‰ -2.0/0.3‰ -1.1/0.7‰ | -25.8‰ -0.1‰ 0.2‰ -0.7‰ -0.3‰ | -27.5/-23.2‰ -0.8/1.1‰ 1.6/2.0‰ -2.0/1.1‰ -1.5/1.2‰ |
| 6 | 葡萄糖中d 13 C值 -与果糖中d 13 C差值 -与二糖中d 13 C差值 -与三糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -25.1‰ 0.1‰ 0.3‰ -1‰ -0.3‰ | -25.8/-23.9‰ -1.2/0.8‰ -0.8/1.8‰ -1.8/0.4‰ -0.8/0.2‰ | -25.7‰ 0.1‰ 0.3‰ -0.6‰ -0.3‰ | -27.2/-22.7‰ -1.1/0.8‰ -1.8/2.0‰ -2.0/2.0‰ -2.0/1.7‰ |
| 7 | 二糖中d 13 C值 -与果糖中d 13 C差值 -与葡萄糖中d 13 C差值 -与三糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -25.3 -0.2‰ -0.3‰ -1.2‰ -0.6‰ | -26.7/-23.9‰ -1.5/1.0‰ -1.8/0.8‰ -2.0/0.3‰ -1.9/0.5‰ | -26.0‰ -0.2‰ -0.3‰ -0.9‰ -0.6‰ | -27.5/-22.5‰ -2.0/1.6‰ -2.0/1.8‰ -2.0/2.0‰ -2.0/1.7‰ |
| 8 | 三糖中d 13 C值 -与果糖中d 13 C差值 -与葡萄糖中d 13 C差值 -与二糖中d 13 C差值 -与蛋白质中d 13 C差值 | -24.1‰ 1.0‰ 1.0‰ 1.2‰ 0.6‰ | -25.3/-22.9‰ -0.3/2.0‰ -0.4/1.8‰ 0.3/2.0‰ -0.5/2.0‰ | -25.1‰ 0.7‰ 0.6‰ 0.9‰ 0.4‰ | -27.1/-22.6‰ -1.0/2.0‰ -1.1/2.0‰ -2.0/2.0‰ -1.2/1.2‰ |
| 9 | 果糖/葡萄糖比值 | 1.61 | 1.50/1.82 | 1.20 | 1.00/1.46 |
| 10 | 二糖相对含量（％） | 8.9 | 5.2/13.7 | 6.1 | 1.2/14.0 |
| 11 | 三糖相对含量（％） | 2.6 | 1.1/5.5 | 1.0 | 0/8.0 |
说明： 表中数据是通过已有的知识获得的，其可靠性有待认证，仅供参考。 备注： d 13 C: 表示待测样品对标准样品 13 C/ 12 C同位素比值的千分差 
