实验方法原理 人胃腺癌SGC27901 细胞株，裸鼠皮下注射(2×106/L 细胞悬液) ，成瘤后反复传代形成实体瘤，以第6 代瘤源为组织材料，打开腹腔，通过“生物胶粘贴法”用OB 医用生物胶将瘤块粘贴在裸鼠胃壁胃大弯血管分布稠密处；待荷瘤鼠出现衰竭体征濒临死亡时处死解剖检查。

实验材料 BALB c nu nu 裸鼠人胃腺癌细胞株SGC-27901

试剂、试剂盒 氯胺酮甲醛石蜡

仪器、耗材 针头OB 生物胶无齿镊丝线光学显微镜

实验步骤

一、皮下种植瘤模型的建立和传代　

BALB/c nu/nu 裸鼠24 只，雄性，6 周龄，体质量18～20 g，SPF 级条件下饲养。人胃腺癌细胞株SGC-27901，2×106/L 细胞悬液裸鼠皮下注射，成瘤后反复传代形成实体瘤，本组瘤源为第6代。

二、人胃癌组织块裸鼠原位种植模型的建立　

1.  实验动物术前禁食12 h， 氯胺酮50 mg/kg 腹腔麻醉，常规消毒，选择左侧正中旁切口进腹， 暴露胃壁， 在胃大弯处近胃窦旁用1 mL无菌空针头划破胃壁浆肌层，用无齿镊将破损处向内推压，使局部胃壁形成凹龛，植入1 块瘤组织块，并在瘤表面滴上1 滴OB 生物胶(由广州白云医用胶公司提供) ，使其覆盖瘤组织表面, 约40 s 凝固后将胃壁回纳入腹腔， 0 号丝线缝合腹膜及皮肤，关腹。

2.  整个过程严格遵循无菌操作。

3.  所有模型动物无麻醉意外，SPF 级饲养。

4.  术后1 周内，死亡2 只。

5.  定时观察所有裸鼠全身状况、运动情况、腹部体征。

6.  当荷瘤鼠出现明显消瘦、弓背、精神萎靡等衰竭体征时，脱颈椎处死解剖， 取原位瘤体、肿大淋巴结、胸腹腔内脏器、收取腹水。

7.  所取标本以10% 甲醛固定， 石蜡包埋、切片， H-E 染色， 作组织病理学检查。

8.  实体瘤细胞染色体鉴定。

其他

一、实验讨论

体外实验虽然能在一定程度上反映胃癌细胞的运动能力和侵袭能力，但是不能完全替代体内胃癌转移的器官环境及转移效果， 因此体内移植模型成为肿瘤实验研究的主要方法。以往多是皮下移植， 但可能因皮下纤维包膜的包绕致转移较少。近年研究表明， 肿瘤细胞株原位种植裸鼠体内不能完全表达肿瘤的生物学特性，而完整组织块原位移植可显著提高转移率。

人胃癌SGC27901 细胞株是低分化腺癌， 适宜作转移模型材料。本实验以SGC27901 裸鼠皮下移植瘤块原位种植裸鼠建立转移模型， 该模型完整地重现了胃癌的临床转移过程，为人类胃癌的生长、转移机制及抗转移治疗方面的研究提供了一种理想的动物模型。

人类染色体46 条，每条染色体的着丝点位置是恒定的，按其着丝点位置可分为4 类， 即中央、亚中央、亚近端及近端着丝点，而鼠组织中全为端着丝点，因此人类组织细胞所形成的肿瘤可用染色体鉴定的技术探测出来。这是一种简便、敏感而可靠的分析方法，可用于各种动物模型转移灶的探测。