凝集反应(直接凝集反应和间接凝集抑制试验)(1)
【原理及意义】
颗粒性抗原（如细菌、细胞）与相应抗体特异性结合，在适当的电解质环境中形成肉眼可见的凝集块的现象，称为凝集反应。包括直接凝集反应（细菌或细胞等颗粒性抗原与相应抗体直接反应出现的凝集现象）和间接凝集反应（将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面，再与相应抗体发生反应出现的凝集现象）。凝集反应广泛地应用于疾病的诊断和各种抗原性质的分析。
（一）直接凝集反应
（1）玻片凝集反应鉴定细菌
【材料】
１试剂：1∶10稀释的伤寒杆菌诊断血清，伤寒杆菌、痢疾杆菌24小时琼脂斜面培养物，生理盐水。
２器材：玻璃蜡笔，载玻片，毛细吸管。
【方法】
１取清洁玻片一张，用蜡笔划为三格，并注明号码。无菌操作下，用接种环于1、2格内加1∶10稀释伤寒杆菌诊断血清1～2滴，第三格加1～2滴生理盐水。
２无菌操作下，用接种环取伤寒杆菌培养物少许，混于第三格中，再混于第一格中（不能先混于第一格再混于第三格，因为这样将使诊断血清混入盐水而影响对照结果），将细菌与盐水或血清混合均匀使呈乳状液。此时取菌量不可过多，使悬液呈轻度乳浊即可。
３同法取痢疾杆菌培养物少许，于第二格内混匀。
４轻轻摇动玻片，经1～2分钟后肉眼观察，出现乳白色凝集块者，即为阳性反应；仍为乳浊液者，即为阴性反应。
（2）玻片凝集反应鉴定ＡＢＯ血型
ＡＢＯ血型系统可分为四种血型：Ａ型、Ｂ型、ＡＢ型和Ｏ型。ＡＢＯ血型系统中有Ａ、Ｂ两种凝集原，红细胞膜上含Ａ凝集原者称为Ａ型血，含Ｂ凝集原者称为Ｂ型血，同时含Ａ、Ｂ两种凝集原者称为ＡＢ型血，无Ａ、Ｂ凝集原者称为Ｏ型血。同时，在人类血清中含有与上述凝集原相对应的天然凝集素，即抗体。ＡＢＯ血型鉴定是用已知的标准Ａ型血清（含Ｂ凝集素）和Ｂ型血清（含Ａ凝集素），分别与被鉴定人的红细胞相混合，依其发生凝集反应的结果判定被鉴定人红细胞表面所含的凝集原而确定的。在正常情况下，ＡＢＯ血型系统中只有相同血型的人才能进行输血，仅在无法得到同型血液的特殊情况下，才可考虑将Ｏ型血输给其他血型的人，而且限定在300mL以内，并且应缓慢输入。
【材料】
１试剂：标准Ａ血清，标准Ｂ血清，酒精棉球，无菌干棉球。
２器材：玻璃蜡笔，载玻片，采血针，毛细吸管。
【方法】
１取清洁玻片一张，用蜡笔划为二格，注明号码，并分别滴加标准Ａ血清和标准Ｂ血清各一滴。
２无菌操作下，用采血针收集受试者耳垂或指端外周血0.5～1mL。
３分别滴加受试者外周血一滴。
４轻轻摇动玻片，经1～2分钟后肉眼观察。如两者均凝集则为ＡＢ型血，均不凝集则为Ｏ型血，Ａ标准血清凝集而Ｂ标准血清不凝集则为Ａ型血，Ａ标准血清不凝集而Ｂ标准血清凝集则为Ｂ型血。
（3）试管凝集反应
【材料】
１试剂：1∶10稀释的伤寒诊断血清，菌液（伤寒杆菌“Ｈ”菌液，伤寒杆菌“Ｏ”菌液），生理盐水。
２器材：试管架，小试管，吸管，玻璃蜡笔。
【方法】
１取洁净小试管14只分两排排列于试管架上，每排7只依次用蜡笔注明号码，于每
管中分别加入0.5mL生理盐水。
