酵母菌二倍体细胞的孢子形成实验
二倍体酵母菌细胞处于氮源和碳源均饥饿的状态时,可诱导减数分裂和孢子形成。此时,它们的染色体复制,进行二次分裂产生单倍体核。
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 一、在平板上形成孢子
如果无需选择的活,细胞在转移到孢子形成平板之前,可以在YPD平板上先培养几天。单个菌落在YPD平板上生长3~4天,而对小块细胞来说,可在平板上生长2天,这种预生长并非必需的,但它可以使孢子形成的效率更高些,在转移酵母细胞时,应用少量细胞在孢子形成平板上涂布相对较大的面积,不应见到成团的接种物。
2. 于25℃培养4天。
3. 在载玻片上滴一滴水,挑少量细胞稀释在水中,于放大倍数250×~400×显微镜下观察,即可见悬浮于水中的四分体孢子。
二、在液体培养基中形成孢子
1. 在合适的培养容器中,加入YPD培养基培养,待孢子形成的二倍体细胞生长至OD600为2.5~3.0。
5. 于30℃,350 r/min 以上转速培养2~3天,在显微镜下检查孢子的形成。 展开 |
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