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竞争法酶联免疫吸附测定的操作步骤

2022.11.15

⑴将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。

⑵待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。

⑶加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原最多,故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。一般情况,是通过方波伏安法,检测培养体系的峰电流,通过峰电流与抗原抗体的线性关系来最终确定体系的最终检测目标的浓度。


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