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高效液相色谱仪(HPLC)选型指南(上)

2018.3.06

高效液相色谱仪(HPLC,High Performance Liquid Chromatography)如何选型?格图在线资深仪器工程师告诉您几招,轻松搞定高效液相色谱仪选型难题。


 

高效液相色谱仪的选型,归结起来就是2个问题:如何确定高效液相色谱仪的配置?如何选择高效液相色谱仪的品牌?

今天我们就来谈谈第一问题,如何确定高效液相色谱仪的配置?

高效液相色谱仪可以分为5大部分:高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元,下面我们来逐一分析,谈谈高效液相色谱仪的选型细则。

1、 高压输液泵单元的配置选型:

高效液相色谱仪的高压输液方式分为等度方式、梯度方式两大类别。

等度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比例不随时间发生变化,例如某次分析过程中流动相中甲醇与水的比例是50:50一直保持不变,那么这种就叫做等度方式。

梯度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比例随时间发生发生变化,例如某次分析过程中,随着时间的推移,流动相中其中一种(或几种)溶剂比例逐渐增大、另一种或几种溶剂的比例逐渐减少,最终那么这种输液方式就叫做梯度方式。

相应以上2种流动相输液方式,有等度泵和梯度泵这两种配置方式。

等度泵:一般采用单泵来作为高压输液泵单元,这是一种最简单最经济的配置方式。

梯度泵:又分为高压梯度、低压梯度。

高压梯度:常用的是二元高压梯度泵,也有三元高压梯度泵;我们通常所说的双泵,就是指“二元高压梯度泵”。 有几元高压,则必须有几台泵;高压梯度泵单元,除了几台高压泵之外,还需要有配套的流动相混合装置(通常采用混合器);由于是高压混合的梯度方式,所以通常不太会产生气泡,脱气机通常可以不用配备。

低压梯度:与高压梯度“有几元高压就用几台泵”所不同的是,低压梯度只需要一台高压泵,但是在高压泵的前端,需要加上比例阀(有的公司称为低压梯度单元),通过比例阀来调节几种不同流动相进入高压泵的比例,从而实现梯度淋洗。因为低压下各种不同溶剂混合时可能产生吸热或放热,所以对于低压梯度泵单元来说,流动相脱气机与混合器一样,都是必不可少的。

高效液相色谱仪(HPLC)的高压输液泵单元的选型,主要是根据所检测项目方法的所需来定,方法中流动相输液是等度方式,那么等度泵(单泵)即可满足需求;如果方法中规定需要用到梯度淋洗输液方式,那么就需要选择梯度泵了。

在一些有HPLC分析方法开发任务的单位,为了满足将来可能的方法开发需要,即便暂时不需要梯度泵,也往往会配备梯度泵以利拓展方法。

2、 进样器单元的配置选型

      高效液相色谱仪(HPLC)的进样器单元,有2种配置可供选择:手动进样器、自动进样器。

      手动进样器:无论是国产还是进口大牌,例如沃特世(Waters)、岛津(Shimadzu)、安捷伦(Agilent),世界上绝大多数公司均采用美国Rheodyne公司生产的六通进样阀作为高效液相色谱仪的手动进样阀。

     自动进样器:自动进样器的最大优点就是,能极大的提高设备使用效率、减少人力成本。例如一个公司的HPLC使用部门,可以在下午下班之前,把未做完的50个样品都放进自动进样器内,然后设定分析程序、仪器清洗程序、关机程序,然后所有的人都可以下班,无需派人值守,第二天早上打印图谱、上报数据即可。


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