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简述透射电镜及扫描电镜样品制作流程

2018.3.15

1、透射电镜样品制作流程为取材——漂洗(生理盐水)——前固定(2.5%

戊二醛,4ºC冰箱2小时以上)——漂洗(0.1M 磷酸缓冲液,3次,45分钟)——后固定(1%锇酸1小时左右)——漂洗(0.1M 磷酸缓冲液,3次,45分钟)——块染(1%醋酸铀2小时)——梯度脱水(50%70%80%90%丙酮各15分钟, 100%丙酮 2次,各10分钟)——浸透(丙酮:包埋液=1137 ºC烘箱2小时;丙酮:包埋液=14 37ºC烘箱过夜;纯包埋液45ºC烘箱2小时)——包埋聚合(45ºC烘箱3小时,65ºC烘箱48小时)。

2、扫描电镜样品制作流程为取材(做好样品观察面的标志)——漂洗(生理盐

水或缓冲液)——固定(2.5%戊二醛2小时以上)——漂洗(0.1M磷酸缓冲液,3次,45分钟)——后固定(1%锇酸,2小时)——脱水( 50%70%80%90%95%15分钟,换醋酸异戊酯15分钟或叔丁醇15分钟)——干燥(零界点干燥或冷冻干燥)——镀膜(真空镀膜仪或离子溅射仪) 


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