再生心肌细胞中Meis1 的辅助因子的使用（二）

■ 主要实验方法

免疫荧光染色；免疫印迹 (WB) ；免疫共沉淀 (Co-IP) ； 染色质免疫共沉淀结合下 一代测 序 (ChIP-seq) ；磁共振成像；经胸超声心动图检测；TUNEL 分析。

实验结果

■ Hoxb13 与 Meis1 的关联

此前的研究中，Sadek 的研究团队已经发现 Hox 蛋白家族与 Meis1 有紧密联系。在这次的研究中，通过在心脏损伤后进行再修复的 7 天内 (P1-P7) 检测 Hoxb13 蛋白家族的表达发现，Hoxb13 是再生后心肌细胞中与 Meis1 相互作用的转录因子。

图 2. 再生后早期 Hoxb13 的表达与 Meis1 相关
【Postnatal day：再生后天数；
P1：Hyperplastic growth，增生性生长; 
P7：Hypertrophic growth，肥厚性生长】

■ Hoxb13 的遗传缺失

首先，研究团队通过 Hoxb13-KO 小鼠发现，短时间内 Hoxb13 的缺失诱导心肌细胞增殖。另外，在注射 Tamoxifen 后，成年 Hoxb13-iKO 小鼠心脏 Hoxb13 蛋白减少，心肌细胞横截面积 (CSA) 显著减小，单核心肌细胞的比例也显著增加，而双核和多核心肌细胞的比例显著下降。两种小鼠实验结果表明，心肌细胞特异性 Hoxb13 缺失足以诱导成年小鼠心肌有丝分裂。

图 3. Hoxb13 缺失诱导小鼠心肌细胞有丝分裂和左心室射血分数 (LVEF) 的下降

除此之外，成年 Hoxb13-KO 小鼠中诱导了心肌梗死 (MI)，发现 Hoxb13 的敲除可以防止 LVEF 的下降，但是左心室收缩功能并没有改善。总的来说，Hoxb13 的缺失可预防 MI 后收缩功能的逐步恶化，但不会引起实质性功能恢复。

■ Meis1 和 Hoxb13 蛋白共同缺失

Meis1-Hoxb13 的缺失，即 DKO 小鼠心脏中发现了心脏再生的一些特征，如心肌细胞肌小节分解，单核心肌细胞增加。并且观察到成年小鼠中心肌细胞的增殖也很活跃。他们再进行了进一步的研究，以评估 Meis1 和 Hoxb13 缺失对心肌肥大的影响，发现 DKO 心脏表现出运动诱发的生理性肥厚反应减弱。

图 4. DKO 小鼠心脏表现出
减弱运动诱发的生理性肥大反应