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蛋白质
绿色荧光蛋白融合蛋白
PCR仪电泳槽荧光显微镜
1. 通过基因重组,构建表达融合蛋白GFP-IGF的大肠杆菌重组菌。
2. 纯化融合蛋白,经SDS-PAGE分析为单一条带,分子量36KD。
3. Western印迹与ELISA,验证融合蛋白能特异性地与IGF-1抗体反应,具有IGF-1的抗原性。
4. 表面等离子体共振(SPR)分析,得到GFP-IGF与IGF-1单抗的KD=2.6X10-8M,符合免疫的要求。
5. CD光谱、荧光光谱、荧光寿命分析表明融合蛋白保持了GFP的荧光特性。
1. 注意分子操作的规范。
2. 蛋白纯化应在低温进行。
来源:《绿色荧光蛋白融合技术在激素类兴奋剂检测中的应用》
原国家质检总局 教授