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可以用紫外分光光度法对蛋白质进行定量分析吗

2021.10.22

可以,而且实际上也是这么干的。
不过用紫外分光光度法来分析有两种,一种是直接把蛋白质或氨基酸溶液在OD280下看峰,高级一点的如nanodrop这种机器就可以直接给出蛋白浓度,但这种方法极易受到抽提蛋白时去污剂的影响而出现严重偏差,所以如果是在缓冲液中的纯蛋白是可以这么检测定量的,比如买来的抗体就会提供OD280的数值来计算浓度。
实际中常用的几种蛋白定量是将蛋白或氨基酸的溶液与某些化学物质反应(如bca法、Broadford法等)后在上紫外分光光度计测量OD值,用标准蛋白如BSA做一个标准曲线,再将未知蛋白测得的OD与标曲进行比较测得准确的浓度,在一定的浓度范围内,这些方法的准确性很高。

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