关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

细胞化学染色

2020.9.15

细胞化学染色,是一种以形态为基础,结合运用化学或生物化学技术对血细胞内各种化学成分作定位、定性及半定量分析的方法。用于研究血细胞生理、病理和化学结构;临床上为某些血液病的诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后监测和发病机制的探讨,提供重要依据。

血细胞化学染色的基本要求是在原位显示细胞成分和结构,反应产物应是有色沉淀物,具有一定的稳定性。血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶、蛋白质等。

(一)固定
固定有物理法与化学法,
物理法为干燥和火焰固定,
化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。

(二)显示
1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。
2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。

3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。
4、雪夫反应:过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基,醛基与雪夫试剂作用,使无色品红形成红色沉淀。
5、金属沉着法
其他尚有物理学方法,如脂溶性染料染色(显示脂质)、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。

(三)细胞化学定量
粗略估量,以染色反应的强弱,受色的深浅,人为地区别为阴性和各种程度的阳性。
百分法,只能反映细胞阳性率,不能反映受色强弱。
积分法,是常用的半定量法,将等级估量与百分率相结合它既反映了细胞阳性率的高低,又反映了细胞受色的强弱。

下面介绍几种常用的细胞化学染色方法
这些方法学在白血病的鉴别诊断上具有重要意义。
一、过氧化物酶染色(POX)
(一)四甲基联苯胺法
【原理】 粒细胞和单核细胞的胞浆内的髓过氧化物酶(POX orMPO)分解过氧化氢,释放新生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺,后者进一步变成棕色化合物沉着于细胞质内。

【试剂】
1%TMB
亚硝基铁氰化钠饱和溶液
1%过氧化氢溶液
稀过氧化氢溶液
瑞氏染色液


推荐
关闭