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单细胞分离用于单细胞基因扩增

2021.5.23

 单细胞分离连接不同管径大小的毛细玻璃针,可分离捕获各种非贴壁状态的单细胞和微粒等,如细菌、酵母、藻类细胞、植物花粉、原生动物单细胞、悬浮细胞、血液细胞、免疫细胞、卵细胞、各种悬液中单细胞及特殊标记的单细胞等。

  单细胞分离用于各种类型的细胞分离培养、纯化、检测;获得单克隆细胞;用于单细胞基因扩增,用于单细胞测序等。从异质性的细胞群体中分离单细胞,目前主要有三种选择:手动分离、荧光激活细胞分选和微流体技术。当然,除了成熟的方法,巧妙的新方法也在不断涌现,能以更高的准确性和特异性来分离单细胞。

  如果你想要的细胞已经处于悬浮状态(比如循环肿瘤细胞),而且含量相对比较丰富,那么流式分选将是你的理想选择。如果样本是实体组织,我们可以用酶分解掉胶原和其他细胞外蛋白。不过,酶学消化对细胞影响较大,甚至可能改变基因转录情况。把组织细胞制备成悬液之后,我们就可以通过特异性的荧光标签分离出自己想要的细胞,进一步拿到单细胞是比较棘手的一步,也许要借助微流体设备。

  将细胞分散到悬液中,会失去它们在组织里的位置信息。激光捕获显微切割技术通过扫描组织切片来定位感兴趣的细胞,并将其提取出来,操作者需要小心,以免切到细胞或细胞核。数量稀少的细胞只能用毛细管等器具手动获取。




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