基 本 方 案 1 免 疫 印迹 法 检测 H IV 蛋白

本方案用蛋白质提取法定量测定细胞样品中病毒蛋白的含量。用 抗 H I V -血清及 125I标记的葡萄球菌蛋白 A 来进行检测。也 可 以 用 酶 联 二 抗（生 物 素 化 的 抗 人 I g G 抗体）和适当的颜色指示剂（亲和素-过氧化物酶耦合物及化学发光底物）进行检测以避免使用同位素。任 何 细 胞（包括培养的细胞系、培养的原代细胞及新鲜分离的外周血淋巴细胞）都可以用本方法进行检测。

材 料

待检测的细胞

P B S ，无菌

T E N C 裂解缓冲液，含或不含 2 % 脱氧胆酸钠

转膜缓冲液

l X T N 缓冲液， p H 7. 4

用 I X T N 缓冲液配制的 5 % 脱脂奶粉溶液， p H 7. 4

T N - T N 缓冲液， p H 7.4

抗 H I V 多克隆抗血清

T N - T 缓冲液， p H 7. 4