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植物细胞分裂素的保绿与阻止衰老的作用实验

2019.11.15

实验方法原理:在植物中广泛存在细胞分裂素。它能促进细胞分裂,抑制核酸酶,蛋白酶等一些水解酶的活性,使大分子物质少受破坏。用细胞分裂素处理正在衰老的叶片,能阻止叶绿素的破坏,延长叶片寿命。

把植物的离体叶片放在适宜浓度的细胞分裂素溶液中,置于25-30℃黑暗条件下,叶片中叶绿素的分解比对照慢,证明分裂素具有保绿作用。

实验材料:小麦幼苗

试剂、试剂盒:

激动素溶液

丙酮 

仪器、耗材:

培养皿                                                                  

量筒                                                                                                                                 

药物天平                                                              

小漏斗                                                                  

小剪刀                                                              

容量瓶                                                                 

研钵                                                                  

滤纸                                                                  

721分光光度计

实验步骤:

一、材料与设备

小麦幼苗

直径8cm 培养皿,10  ml 量筒,100  ml 量筒,药物天平,小漏斗,小剪刀,25  ml 容量瓶,研钵,滤纸,721分光光度计

药品

100pp M 激动素溶液:10毫克激动素用少量0.1N HCl溶解,用蒸馏水定容至100  ml 。

丙酮,0.1NHCl,80%g丙酮。

二、实验步骤

1.在7个培养皿中分别加入蒸馏水和0.05pp M ,0.5pp M ,5pp M ,50pp M 的激动素溶液各10  ml 。每一处理重复3次。

2.选生长一致的小麦幼苗,剪下第一完全叶,切去尖端1.5cm ,取其后3cm 长的切断。向每一培养皿放进此切断0.500-1.000克。然后将培养皿放在散射光下培养1-2周。

3.从培养皿中取出小麦叶片,用滤纸吸干水分,放入研钵中。再向研钵中放入少量石英砂,少量碳酸钙以及4-5  ml 80%丙酮,仔细研磨成浆,过滤到100  ml 容量瓶中,研钵用80%丙酮4-5  ml 洗两次,洗出液过滤。滤渣和滤纸再放入研钵中,研磨,过滤。如此反复,直到滤出液无绿色。滤液用80%丙酮定容至100  ml 。

4.将721分光光度计灵敏度转在3的位置,以80%丙酮为空白对照,在663n M 和645n M 处比色。

三、结果

叶绿素浓度按下式计算:

〔ch1〕=20.2×D645+8.02×D663

〔ch1〕=叶绿素浓度,单位 M g/升。

D645:叶绿素溶液在645n M 处的消光值。

D663:叶绿素溶液在663n M 处的消光值。





                                                        



                                                       



                                                        




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